血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
货号 |
MCS甲基柠檬酸合酶测试剂盒微量法 |
50管/24样 |
可见分光光度法 |
LZ-01588S |
商品介绍:
测定意义 测定原理 乳酸在乳酸脱氢酶的作用下生成丙酮酸,同时使NAD+还原生成NADH和H+,H+传递给PMS生成的PMSH2还原INT生成红色物质,在530nm处有特征吸收峰。 自备实验用品及仪器 天平、研钵、离心机、可见分光光度计、1 mL玻璃比色皿、恒温水浴锅。 |
实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
EB病毒转化的人B细胞;KMY0910拓扑替康羧酸钠盐质量规格:美国进口Topotecan Carboxylic Acid Salt
大鼠气管上皮细胞;RTE 慢性髓原细胞,K-562细胞 P3X63Ag8.653细胞,小鼠瘤细胞拓扑替康质量规格:美国进口Topotecan
ACHN, 人肾细胞腺癌细胞 Human15-酮基氟前列醇异丙酯质量规格:美国进口15-keto Fluprostenol isopropyl ester
CRTAM Others Human 人 CRTAM 人细胞裂解液 (阳性对照) 曲唑酮盐酸盐-d6质量规格:美国进口Trazodone-d6
上皮细胞培养基MEpiCMN-去甲基米非司酮质量规格:美国进口N-Demethyl Mifepristone
中国仓鼠卵巢细胞;CHO,英文名或英文缩写:Gallium,级别:CP,98%,规格:25毫升
FGFR3 Others Mouse 小鼠 FGFR3 / CD333 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-基苯 2-Cyanobenzoic acid,88% 3839-22-3 1G 通用试剂
RN-c, 大鼠皮质神经元芳樟醇;里那醇;沉香醇;芫荽醇;沉香萜醇;伽罗;胡荽醇;3,7-二基-1,6-忻二1-3-醇 Linclool;3,7-DiMqthyl-1,6-octcdiqn-3-ol;2,6-DiMqthyl-2,7-octcdiqn-6-ol 78-70-6
INSL4 Others Human 人 INSL4 / EPIL 人细胞裂解液 (阳性对照) Q琼脂糖凝胶FF1克
人皮肤成纤维细胞;CCC-HSF-1139-13-9氮基三乙酸nitnilotriacetic acid
TNFRSF6B Others Human 人 DCR3 / TNFRSF6B 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 芍药内酯苷(标准品)Alibiflorin质量规格:HPLC≥96.50%,标准品
气管上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)蛇床子素(标准品)Osthole质量规格:HPLC≥98%,标准品
蚊源细胞 人腺癌细胞,SW620[SW-620]细胞 HCC 94 [HCC941122](子宫鳞癌细胞(高分化))蛇床子素Osthole质量规格:≥98%,BR
人胃腺癌细胞;BGC-823麝香酮(标准品)Muscone质量规格:GC≥98%,标准品
PVR Others Human 人 CD155 / PVR 人细胞裂解液 (阳性对照) 升麻醇-3-O-β-D-吡喃木糖苷(标准品)Cimigenol-3-O-β-D-xylpyranoside质量规格:HPLC≥98%,标准品
MCS甲基柠檬酸合酶测试剂盒微量法ACP5 Others Mouse 小鼠 ACP5 / AP 人细胞裂解液 (阳性对照)
READYLADDER50BPDNAMARKER#N/A100RXNFROZEN
CM-H037人平滑肌细胞完全培养基100mL录化钡;二水合录化钡 BctiuM chloridq dihydrctq 10361-37-
HCST Others Human 人 HCST / DAP10 人细胞裂解液 (阳性对照) EDTA,0.5MSTERILESOLUTIONEDTA, 0.5M无菌溶液, pH8.0生物技术级100MLRT
人脉络丛上皮细胞HCPEpiC氧化钐shēng huà shì jì容量:25克
DMF7细胞,双位点HC-KIT受体细胞株 人癌高转移细胞,MDA-MB-435细胞 间充质干细胞培养基MSCM-sf1124-11-42,3,5,6-四甲基吡嗪Tetrametxylpyr
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