传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 小鼠杂交瘤细胞株；2D12-A10-F6-C4

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

近缘弯孢Otophylloside B 4'''-O-α-L-cymaropyranoside分子式：C56H90O19

瓜类炭疽菌Otophylloside B分子式：C49H78O16

葱炭疽菌Sarmentocymarin分子式：C30H46O8

新月弯孢Cryptanoside A分子式：C30H42O10

螺卷毛壳Timosaponin B-II分子式：C45H76O19

齐整小核菌Bufotalin分子式：C26H36O6

烟色曲霉Tenacissoside H分子式：C42H66O14

暗孢节菱孢Tauroursodeoxycholic acid分子式：C26H45NO6S

直立枝孢Lithocholic acid分子式：C24H40O3

苹果黑腐皮壳Citrostadienol分子式：C30H50O

坏损假尾孢Cyasterone分子式：C29H44O8

围小丛壳菌Resibufogenin分子式：C24H32O4

山杨黑星孢Taurocholic acid分子式：C26H45NO7S

小穴壳菌Glycodeoxycholic acid分子式：C26H43NO5

壳皮炭疽菌Cinobufagin分子式：C26H34O6

杂色尾孢Sodium cholate分子式：C24H39NaO5

贝伦格葡萄座腔菌Chenodeoxycholic acid分子式：C24H40O4

北方蜜环菌Dioscin分子式：C45H72O16

粉红聚端孢霉Pseudoprotodioscin分子式：C51H82O21

长极链格孢Marsdenoside F分子式：C39H60O14
小鼠杂交瘤细胞株；2D12-A10-F6-C4说明书黄芪异黄烷苷，7,2’-二羟基-3’,4 Astragalus vary Huang Wangan, 7,2 '- two hydroxy -3', 4 规格：HPLC≥98%20mg/支

3-氧去甲双口山酮苷 3- oxygen to a pair of xanthone glycosides 规格：HPLC≥98% 20mg/支

去甲基雏菊叶龙胆口山酮苷 Demethylation Daisy Gentiana xanthone glycosides 规格：HPLC≥98% 20mg/支

去甲基雏菊叶龙胆口山酮 Demethylation Daisy leaves gentisin 规格：HPLC≥98% 20mg/支

桔皮素，橙皮黄素、蜜桔黄酮、橘皮素；5， Hesperetin, orange, tangerine, orange peel flavonoids flavin pigment; 5, 规格：HPLC≥98% 20mg/支

木蝴蝶苷A，黄芩素-7-O-葡萄糖苷 Oroxin A, baicalein -7-O- glucoside 规格：HPLC≥98% 20mg/支

木蝴蝶苷B，黄芩素-7-O-双葡萄糖苷， Oroxin B, baicalein -7-O- diglucoside, 规格：HPLC≥98% 20mg/支

雷公藤内酯甲 Wilforlide a 规格：HPLC≥98% 20mg/支

广藿香酮 Patchoulenone 规格：HPLC≥98% 20mg/支

环巴胺 Cyclopamine 规格：HPLC≥98% 20mg/支

α-亚麻酸 Alpha linolenic acid 规格：HPLC≥98% 20mg/支

β-乙酰氧基异戊酰紫草素 Beta - acetoxy isovaleryl Shikonin 规格：HPLC≥98% 10mg/支