传代方法：

产品仅用于科研收到细胞后，取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。

（一）如果细胞未长满，用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内，严格无菌操作，打开细胞培养瓶，吸出培养液，仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。

（二）如果细胞已长满，即可进行传代培养。具体步骤如下：

1. 弃去培养液，用PBS（不含钙，镁离子）洗1-2次。

2. 加1ml消化液（0.25%Trypsin-0.53mM EDTA）于培养瓶中，倒转放于37度培养箱1-3分钟预热，然后又将培养瓶倒转大约30秒后，在倒置显微镜下观察细胞消化情况，若细胞大部分变圆分散，轻敲几下培养培养瓶，细胞随即脱落下来。

3. 加入6-8ml完全培养基，吸出，分到新的培养瓶中。一传二。

注意：传代后一半用我们的培养基，一半用你们的，以免细胞不适应而造成生长不好。

细胞名称 兔正常肺上皮细胞；RNLEC/HL-029RabbitNormalLungEpithelialCellsRNLEC/HL-029

形态特性: 淋巴母细胞样

生长特性: 悬浮生长

特征特性: 该细胞属专利保藏，其特征特性尚未公开。

培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle＇sBalancedSalts)10%FBS

传代方法: 1:3传代，3-4天传1次

传代情况: C5

冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS

注意事项：

1.接收到细胞，肉眼观察细胞培养基颜色，显微镜观察细胞生长情况，并对细胞进行不同倍数拍照（建议收到时的培养瓶拍一张照片，显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张）。

2.用75%的酒精消毒（建议配置75%的酒精的水是灭菌过的）。

3.严格无菌操作，打开细胞培养瓶。

4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出（严禁直接倾倒），放入另一无菌容器中（建议换新的培养基培养细胞）。

5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面，洗3-4次遍，加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆，轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落，加入终止液终止。

6.1000rpm，5min离心，重悬细胞。

7.换新的细胞培养瓶，37℃，5%CO2培养。

操作要点：

1）将培养基在37℃水浴锅预热；准备一个15mL无菌的离心管，加入8mL预热培养基。

2）将冻存细胞从液氮罐中取出，快速放入37℃水浴锅中复温（可准备一洁净的烧杯，装满37℃的水，细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内，再逐步转移到水浴锅中）。轻轻晃动冻存管，使细胞能在1~2min内完全解冻，使细胞能尽快通过最易受损的温度段（-5~0℃）。注意冻存管管口不能没入水中，BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。

3）用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内，将管内细胞转移至准备好的离心管内，轻轻吹打液体，使细胞均匀分散，降低DMSO浓度，吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次，均转移至离心管内。

4）800rpm离心5min，弃上清，加入新鲜的培养基，吹打制成细胞悬液。

5）将细胞悬液转移至T25细胞瓶内，补加适量的培养基，轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀，放入温箱内培养。

6）产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况，换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养，待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代，细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明：本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品，严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。

杂交瘤细胞；41002Eicosanyl caffeate分子式：C29H48O4

杂交瘤细胞；2G4Octadecyl p-coumarate分子式：C27H44O3

杂交瘤细胞；6B8D11H12Caffeic acid phenethyl ester分子式：C17H16O4

杂交瘤细胞；5G9A10E3Ethyl cinnamate分子式：C11H12O2

杂交瘤细胞；4E5F4A11Sodium danshensu分子式：C9H9NaO5

杂交瘤细胞；D94-Methoxycinnamyl alcohol分子式：C10H12O2

杂交瘤细胞；LW-5F3Methyl 4-prenyloxycinnamate分子式：C15H18O3

杂交瘤细胞；4F9(E)-Cinnamyl-(Z)-p-coumarate分子式：C18H16O3

杂交瘤细胞；4D2Benzyl p-coumarate分子式：C16H14O3

杂交瘤细胞；15A7Cinnamyl isoferulate分子式：C19H18O4

杂交瘤细胞；3G4Cinnamyl caffeate分子式：C18H16O4

杂交瘤细胞；2B1Cinnamyl coumarate分子式：C18H16O3

杂交瘤细胞；M08#15Benzyl ferulate分子式：C17H16O4

杂交瘤细胞；19A43-Hydroxy-1-(4-hydroxyphenyl)propan-1-one分子式：C9H10O3

杂交瘤细胞；15B8Ethyl 3-(4-hydroxyphenyl)propionate分子式：C11H14O3

杂交瘤细胞；4A101-O-p-Coumaroylglycerol分子式：C12H14O5

杂交瘤细胞；2CKmeriol分子式：C12H18O5

杂交瘤细胞；1B12株Triandrin分子式：C15H20O7

杂交瘤细胞；2H5B12C3γ-Asarone分子式：C12H16O3

杂交瘤细胞；2B4Methoxyeugenol分子式：C11H14O3
兔正常肺上皮细胞；RNLEC/HL-029RabbitNormalLungEpithelialCellsRNLEC/HL-029说明书苯乙酰谷氨酰胺 Acetyl glutamine 规格：40mg/支

马尿酸 Hippuric acid 规格：40mg/支

5'－羟基吲哚乙酸 5'hydroxyindoleacetic acid 规格：10mg/支

4'－羟基乙酸 4'hydroxy benzene acetic acid 规格：10mg/支

5＇-胞苷酸 5 '- cytidylic acid 规格：10mg/支

鲑降钙素(鉴别） Salmon calcitonin (differential) 规格：1mg/支

门冬酰胺酶（欧文菌） Asparaginase (Ou Wenjun) 规格：5mg/支

门冬酰胺酶（大肠） Asparaginase (e.) 规格：5mg/支

尤瑞克林 Yurek Lin 规格：1.6PNA单位/支

醋酸奥曲肽 Octreotide acetate 规格：20mg/支

赖脯 Insulin lispro 规格：25mg/支

胸腺五肽 Five thymus peptide 规格：50mg/支