巴氏探针法荧光定量PCR试剂盒准备试剂与收集血样:
双重核酸试剂盒(荧光PCR法) 1. 收集标本:血清、血浆(EDTA 、柠檬酸盐、肝素抗凝)、细胞培养上清液、组织匀浆等尽早检测, 2-8 ℃ 保存48 小时;更长时间须冷冻( -20 ℃或 -70 ℃ )保存,避免反复冻融。
2. 标准品液配制:使用前加入0.5ml 蒸馏水 混匀,配成 120 0ng/ml 的溶液 。 设标准 管 8 管,管加标本稀释液 900ul ,第二至第八管加入标本稀释液 500ul 。在管中加入 120 0ng/ml 的标准品溶液 100ul 混匀后用加样器吸出 500ul ,移至第二管 。如此反复作对倍稀释,从第七 管 中吸出 500ul 弃去。第八 管 为空白对照。
3. 10× 标本稀释液用蒸馏水作 1: 1 0 倍稀释( 示例: 1ml浓稀释液 +9ml 蒸馏水)。
4. 洗涤液:用重蒸水 1:20 稀释(示例:1ml 浓缩洗涤液加入 19ml 的重蒸水)
检测程序:
1. 加样:每孔各加入标准品或待测样品 100ul ,将反应板充分混匀后置 37 ℃ 120 分钟。
2. 洗板:用洗涤液将反应板充分洗涤 4-6 次,向滤纸上印干。
3. 每孔中加入抗体工作液10 0ul 。将反应板充分混匀后置 37 ℃ 6 0 分钟。
4. 洗板:同前。
5. 每孔加酶标抗体工作液100ul 。将反应板置 37 ℃ 3 0 分钟。
6. 洗板:同前。
7. 每孔加入底物工作液100ul ,置 37 ℃ 暗处反应15 分钟。
8. 每孔加入100ul 终止液混匀。
9. 30分钟内用酶标仪在 45 0 nm 处测 吸光值。
性能:
1. 准确性:标准品线性回归与预期浓度相关系数R值,大于等于0.9900。
2. 灵敏度:检测浓度小于0.1 U/mL。
3. 特异性:不与其它可溶性结构类似物交叉反应。
4. 重复性:板内、板间变异系数均小于15%。
5. 贮藏:2-8℃,避光防潮保存。
6. 有效期:6个月
戈氏放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Actinomyces gerencseriae
衣氏放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Actinomyces israelii
内氏放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Actinomyces naeslundii
化脓放线菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Actinomyces pyogenes
放线菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Actinomyces spp.
腺伴随病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 Adeno-associated Virus(AAV)
腺病毒A型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒B型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒C型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒D型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒E型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒F型探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
腺病毒通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Adenovirus(AV)
嗜水气单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Aeromonas hydrophila
斑点气单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Aeromonas punctata
灭鲑气单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Aeromonas salmonicida
温和气单胞菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Aeromonas sobria
气单胞菌通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Aeromonas spp.
蜂房小甲虫探针法荧光定量PCR试剂盒 Aethina tumida
阿菲波菌属通用探针法荧光定量PCR试剂盒 Afipia spp.
非洲猪瘟病毒探针法荧光定量PCR试剂盒 African Swine Fever Virus(ASFV)
放线共生放线杆菌探针法荧光定量PCR试剂盒 Aggregatibacter actinomycetemcomitans