人肾素(Renin)检测试剂盒(ELISA方法)操作程序-上海联祖生物科技有限公司

首页 > 公司动态 > 人肾素(Renin)检测试剂盒(ELIS...

人肾素(Renin)检测试剂盒(ELISA方法)操作程序

2023-01-05

人肾素(Renin)检测试剂盒(ELISA方法)操作程序：
1.已稀释好的ABC和TMB显色液在加入酶标板孔前都应预先在37℃中平衡至少30分钟。试剂或样品稀释时，切不可忘记混匀。每次检测都应该做标准曲线。用户须估计样品待测因子的含量，决定适当的稀释倍数。
确定本次检测所需的已包被抗体的酶标板孔数目，并增加1孔作为TMB空白显色孔。总数=样品数+9；做双份检测时×2。其余重包装好放入冰箱中。
2.将2000pg/ml,1000pg/ml，500pg/ml，250pg/ml，125pg/ml，62.5pg/ml，31.2pg/ml的标准品各100μL依次加入一排7孔中，1孔只加样品稀释液的作为零孔。对于人血清、血浆、尿液、细胞裂解液或细胞培养上清，直接加已用样品稀释液稀释的样品100μL。
3.酶标板加上封板膜，37℃反应90分钟。
4 .反应后用自动洗板机吸去酶标板内的液体；或甩去酶标板内液体，再对着吸水纸拍几下。不洗。
5.将准备好的生物素抗人renin抗体工作液按每孔100μL依次加入（TMB空白显色孔除外）。
6.酶标板加上封板膜，37℃反应60分钟。
7.1X洗涤缓冲液洗涤3次，每次浸泡1分钟左右（每孔洗液至少300μL）。
8.将准备好的ABC工作液按每孔100μL依次加入（TMB空白显色孔除外）。
9.酶标板加上封板膜，37℃反应30分钟。
10.1X洗涤缓冲液洗涤5次，每次浸泡1～2分钟左右（每孔洗液至少300μL）。

11.按每孔90μL依次加入已在37℃平衡30分钟的TMB显色液，37℃避光反应25～30分钟。

注意：显色时间供参考，因用户实验室条件差异，最佳显色时间会有所不同。此时肉眼可见标准品的前3～4孔有明显的梯度蓝色，后3～4孔差别不明显。
12.按每孔100μL依次加入终止液，此时蓝色立转黄色。

13.用酶标仪在450nm测定O.D.值。

14.有两种设定空白对照的方案：
① 将TMB空白显色孔(只加TMB显色液和终止液)设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去TMB空白显色孔的吸光值后，在坐标纸上画出曲线，以吸光值作为纵坐标，以浓度作为横坐标。
② 将零孔设为对照。所有的标准品和样品的吸光值减去零孔的吸光值后，得到的数据可以直接在坐标纸上画出曲线。

根据样品的吸光值在坐标上找出对应的浓度。用户也可以使用各种应用软件来计算。应记住由于样品稀释了N倍，其实际浓度应该×N。

果糖测试盒 Fructose test case
超氧化物歧化酶（SOD）测试盒 Superoxide dismutase (SOD) test kit
超氧化物歧化酶（SOD）分型测试盒 Superoxide dismutase (SOD) typing test case
黄嘌呤氧化酶（XOD）测试盒 Xanthine oxidase (XOD) test kit
丙二醛（MDA）测试盒 Malondialdehyde (MDA) test kit
微量丙二醛（MDA）测试盒 Micro malondialdehyde (MDA) test kit
谷胱甘肽－S转移酶（GSH－ST）测试盒 Glutathione S-transferases (GSHST) test kit
谷胱甘肽－过氧化物酶（GSH－PX）测试盒 Glutathione peroxidase (GSH-Px) test kit
还原型谷胱甘肽（GSH）测试盒 Reduced glutathione (GSH) test kit
氧化型谷胱甘肽（GSSG）测试盒 Oxidized glutathione (GSSG) test kit
谷胱甘肽－还原酶（GR）测试盒 Glutathione reductase (GR) test kit

上一篇：NAD苹果酸脱氢酶（NADMDH）生化试剂盒（紫外分光光度法）操作步骤下一篇：跨膜蛋白SEMA5A抗体产品特点稀释方法