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PLA2磷脂酶A2测试剂盒可见分光光度法操作步骤

2023-02-09
PLA2磷脂酶A2测试剂盒可见分光光度法操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1.        加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2.        弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4.        每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5.        温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6.        依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7.       依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。

8.       用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。

改良CCD琼脂基础 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每100mL基础培养基需添加1支配套试剂
Bolton肉汤基础 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌的选择性增菌(GB),每100mL基础培养基需添加1支配套试剂(SR0340)
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血,用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)
Skirrow琼脂配套试剂 规格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Skirrow琼脂基础中
改良CCD琼脂配套试剂 规格: 10支/盒 作用: 每支添加于100ml(022212)中配成MLST
Bolton肉汤配套试剂 规格: 10支/盒 作用: 每支添加于100mL的 Bolton 肉汤基础中
水解酪蛋白胨(MH)琼脂 规格: 250g 作用: 灭菌后冷却至45℃左右时加入5%的脱纤维羊血,配成Mueller Hinton 血平板,用于空肠弯曲菌的药敏试...
布氏肉汤 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌培养及运动性观察。(GB、ISO)
Skirrow琼脂 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每100mL基础培养基需添加2支配套试剂。(SR0330)
改良CCD琼脂基础 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌的选择分离培养(GB、ISO),每100mL基础培养基需添加1支配套试剂
Bolton肉汤基础 规格: 250g 作用: 用于空肠弯曲菌的选择性增菌(GB),每100mL基础培养基需添加1支配套试剂(SR0340)
哥伦比亚琼脂培养基 规格: 250g 作用: 灭菌后冷至45℃左右时加入5%脱纤维羊血,用于空肠弯曲菌的培养。(CP、GB、EP、USP)
高氏合成1号琼脂培养基 规格: 250g 作用: 供放线菌培养用。
血平板 (成品培养基) 规格: 20个/盒 作用: 用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验
哥伦比亚血平板(成品培养基) 规格: 20个/盒 作用: 用于一般病原菌的分离培养和溶血性细菌的鉴别
改良克氏双糖培养基 规格: 250g 作用: 用于小肠结肠炎耶尔森氏菌的鉴定
硝酸盐蛋白胨水培养基 规格: 250g 作用: 用于鉴别绿脓杆菌分解硝酸盐产气试验
半固体琼脂 规格: 250g 作用: 供细菌动力观察、菌种保存,H抗原位相变异试验等。(美国FDA、SN、GB)
3%氯化钠三糖铁琼脂 规格: 250g 作用: 用于副溶血性弧菌的生化反应。(GB、SN)
血琼脂培养基基础 规格: 250g 作用: 加入脱纤维羊血或兔血,制成血琼脂培养基,用于营养要求较高的细菌的培养及溶血试验