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人B因子(BF)elisa试剂盒操作步骤

2023-07-11
人B因子(BF)elisa试剂盒操作步骤

1. 标准品的稀释与加样:在酶标包被板上设标准品孔10孔,在di一、第二孔中分别加标准品100μl,然后在di一、第二孔中加标准品稀释液50μl,混匀;然后从di一孔、第二孔中各取100μl分别加到第三孔和第四孔,再在第三、第四孔分别加标准品稀释液50μl,混匀;然后在第三孔和第四孔中先各取50μl弃掉,再各取50μl分别取50μl分别加到第七、第八孔中,再在第七、第八孔中分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第七、第八孔中加到第五、第六孔中,再在第五、第六孔中分别加标准品稀释液50ul,混匀;混匀后从第五、第六孔中各分别取50μl加到第九、第十孔中,再在第九第十孔分别加标准品稀释液50μl,混匀后从第九第十孔中各取50μl弃掉。(稀释后各孔加样量都为50μl,浓度分别为180 ng/L,120 ng/L ,60 ng/L,30 ng/,15 ng/L)。
2. 加样:分别设空白孔(空白对照孔不加样品及酶标试剂,其余各步操作相同)、待测样品孔。在酶标包被板上待测样品孔中先加样品稀释液40μl,然后再加待测样品10μl(样品最终稀释度为5倍)。加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀。
3. 温育:用封板膜封板后置37℃温育30分钟。
4. 配液:将30(48T的20倍)倍浓缩洗涤液用蒸馏水30(48T的20倍)倍稀释后备用。
5. 洗涤:小心揭掉封板膜,弃去液体,甩干,每孔加满洗涤液,静置30秒后弃去,如此重复5次,拍干。
6. 加酶:每孔加入酶标试剂50μl,空白孔除外。
7. 温育:操作同3。
8. 洗涤:操作同5。
9. 显色:每孔先加入显色剂A50μl,再加入显色剂B50μl,轻轻震荡混匀,37℃避光显色15分钟.
10. 终止:每孔加终止液50μl,终止反应(此时蓝色立转黄色)。

11. 测定:以空白空调零,450nm波长依序测量各孔的吸光度(OD值)。 测定应在加终止液后15分钟。

A4GALT α1,4-半乳糖基转移酶1
AGTRAP 血管紧张素Ⅱ受体相关蛋白抗体
AX2R 膜粘连蛋白2受体抗体
ACEI 血管紧张素1转换酶抑制剂抗体
AATF 拮抗凋亡转录因子抗体
AACT-Alpha1 α-1抗胰糜蛋白酶抗体
alpha 1 Antitrypsin α-1抗胰蛋白酶抗体
ABCB6 ATP结合蛋白家族6抗体
ABCG1 三磷酸腺苷结合盒亚家族G1抗体
Adiponectin receptor 2 脂联素受体2抗体
ANGEL1 ANGEL1蛋白抗体
ANGEL2 ANGEL2蛋白抗体
ANKLE2 ANKLE2蛋白抗体
ANKMY1 睾丸特异性锚样蛋白1抗体
ANKRD13B 锚蛋白重复结构域蛋白13B抗体
ANKRD20A1 锚蛋白重复结构域蛋白20A1抗体
ANKRD20A3 锚蛋白重复结构域蛋白20A3抗体
ANKRD22 锚蛋白重复结构域蛋白22抗体
ANKRD50 锚蛋白重复结构域蛋白50抗体
ATP6V1G2 氢离子转运ATP合成酶6G抗体
ANKRD26 锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
ANKRD26 锚蛋白重复结构域蛋白26抗体
ACY3 丙型肝炎病毒核结合蛋白-1抗体
ARSK 芳香基硫酸酯酶K抗体