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大鼠肺小动脉平滑肌细胞注意事项

2024-02-27
大鼠肺小动脉平滑肌细胞注意事项:

1、培养基于4℃条件下可保存3个月;
2、在细胞培养过程中,请注意保持无菌操作;
3、传代培养过程中,胰酶消化时间不宜过长,否则会影响细胞贴壁及其生长状态;
4、建议客户收到细胞后前3天每个倍数各拍几张细胞照片,记录细胞状态,便于和技术支持沟通,若细胞由于运输等问题导致细胞状态不稳定或者污染,请及时和我们联系,详尽告知细胞具体情况,方便我们技术人员跟踪、解决。

5、该细胞只可用于科研。

使用方法
在技术部标准操作流程下,小鼠棕色脂肪细胞不建议传代;建议您收到细胞后尽快进行相关实验。
客户收到细胞后,请按照以下方法进行操作。
1、取出25cm2培养瓶,75%酒精消毒,拆下封口膜,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中静置3-4h,以稳定细胞状态;
2、待细胞达到80%汇合时准备进行传代培养;
3、细胞传代
1) 吸出25cm2培养瓶中的培养基,用PBS清洗细胞一次;
2) 添加0.25%胰蛋白酶消化液约1ml至培养瓶中,37℃温浴3min左右;倒置显微镜下观察,待细胞回缩变圆后吸弃消化液,再加入完全培养液终止消化;
3) 用吸管轻轻吹打混匀,按1:2适当的比例进行接种传代,然后补充新鲜的完全培养基至5ml,放入37℃,5%CO2细胞培养箱中培养;
4)待细胞完全贴壁后,培养观察。之后每隔2-3天更换新鲜的完全培养基。