ELISA试剂盒的基础是抗原或抗体的固相化及抗原或抗体的酶标记。结合在固相载体表面的抗原或抗体仍保持其免疫学活性，酶标记的抗原或抗体既保留其免疫学活性，又保留酶的活性。再加入酶标记的抗原或抗体，也通过反应而结合在固相载体上。在测定时，受检标本（测定其中的抗体或抗原）与固相载体表面的抗原或抗体起反应。用洗涤的方法使固相载体上形成的抗原抗体复合物与液体中的其他物质分开。

      此时固相上的酶量与标本中受检物质的量呈一定的比例。加入酶反应的底物后，底物被酶催化成为有色产物，产物的量与标本中受检物质的量直接相关，故可根据呈色的深浅进行定性或定量分析。由于酶的催化效率很高，间接地放大了免疫反应的结果，使测定方法达到很高的敏感度。 ELISA试剂盒可用于测定抗原，也可用于测定抗体。然而，故加强各个环节的质量保证才能充分发挥其方法学的优点。

操作注意事项：

（1）试剂应按标签说明储存，使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃。

（2）实验中不用的板条应立即放回包装袋中，密封保存。

（3）不用的其它试剂应包装好或盖好。

（4）使用一次性的吸头以免交叉污染。

（5）用干净的塑料容器配置洗涤液。用前充分混匀试剂盒里的各种成份及样品。

（6）洗涤酶标板时应充分拍干，不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。

（7）底物A应挥发避免长时间打开盖。底物B对光敏感避免长时间暴露于光下。

（8）加入试剂的顺序应一致，以保证所有反应板孔温育的时间一样。

（9）ELISA试剂盒按照说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。此外，（10）在加样过程中，应避免产生气泡，以免影响反应结果。若不慎产生气泡，应轻轻晃动酶标板以去除。（11）读取结果时，应使用专业的酶标仪，确保波长准确，避免人为误差。读取时间也需严格按照说明书执行，过早或过晚都可能影响结果的准确性。（12）每次实验应设立阴性对照和阳性对照，以监控实验过程的有效性，确保实验数据的可靠性。（13）对于异常结果，应进行重复实验验证，避免单一实验的偶然性导致的误判。（14）实验结束后，所有使用过的器材和试剂应按照生物安全规定妥善处理，防止环境污染和交叉感染。遵循以上操作注意事项，不仅能确保ELISA试剂盒的准确性和灵敏度，还能有效延长其使用寿命，为科研和临床诊断提供坚实的技术支持。