如何选择合适的指示细胞进行验证？
2025-10-23
选择合适的指示细胞进行验证需综合考虑以下关键因素：
1. 与目标病毒的关联性
优先选择与潜在污染病毒生物学特性（如基因组类型、包膜结构、复制机制）高度相关的指示病毒。例如：血液制品应选择相关人类病毒（如HBV、HCV）；杆状病毒表达系统需选用BV病毒；CHO细胞系建议使用MuLV（有包膜RNA病毒）或MVM（无包膜DNA病毒）作为模型病毒。
2. 培养可行性与安全性
指示病毒需满足：
易于体外培养且滴度可控；
对人类无致病性或低生物危害风险；
对验证工艺（如灭活/去除步骤）具有耐受性。
3. 覆盖病毒清除能力验证
为全面评估工艺效果，需组合使用不同特性的病毒：
DNA/RNA病毒：如PRV（DNA）和Reo3（RNA）；
包膜/无包膜病毒：如MuLV（有包膜）和MVM（无包膜）；
不同耐受性病毒：选择对物理/化学处理敏感或耐受的病毒。
4. 法规与标准化要求
需符合药典（如USP）或技术指南（如ICH Q5A）的推荐方法，例如：
支原体检测可采用指示细胞法（Vero细胞）或核酸法；
细胞治疗产品需通过微卫星基因多态型等分子标记进行细胞系鉴定。
5. 实验适配性
?增殖检测?：优先选用3H-TdR掺入法或MTT比色法，需验证细胞对指示病毒的响应线性范围?；
?功能验证?：如IL-2活性检测需依赖CTLL-2细胞增殖模型。
6. 替代方案设计
当无法获取相关病毒时，可选用：
特异模型病毒：如CHO系统的MuLV；
非特异模型病毒：如PRV（覆盖广谱清除能力）。
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