传代方法:
产品仅用于科研收到细胞后,取出培养瓶在倒置显微镜下观察细胞生长情况。
(一)如果细胞未长满,用75%酒精喷洒整个瓶消毒后放到超菌台内,严格无菌操作,打开细胞培养瓶,吸出培养液,仅留下10ml培养液在瓶内继续培养。。
(二)如果细胞已长满,即可进行传代培养。具体步骤如下:
1. 弃去培养液,用PBS(不含钙,镁离子)洗1-2次。
2. 加1ml消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,倒转放于37度培养箱1-3分钟预热,然后又将培养瓶倒转大约30秒后,在倒置显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分变圆分散,轻敲几下培养培养瓶,细胞随即脱落下来。
3. 加入6-8ml完全培养基,吸出,分到新的培养瓶中。一传二。
注意:传代后一半用我们的培养基,一半用你们的,以免细胞不适应而造成生长不好。
产品名称 | 人细胞;KMS-11规格 |
生长特性 | 贴壁和悬浮混合生长 |
货号 | LZX9322 |
细胞名称 人细胞;KMS-11
形态特性: 淋巴母细胞样
生长特性: 贴壁和悬浮混合生长
特征特性: 该细胞源自一名67岁患有的女性的。
培养条件: 10%FBS
传代方法: 保持细胞密度在1×105~1×106cells/ml之间,每周换液2~3次
传代情况:
冻存条件: 基础培养基+5%DMSO+20%FBS
注意事项:
1.接收到细胞,肉眼观察细胞培养基颜色,显微镜观察细胞生长情况,并对细胞进行不同倍数拍照(建议收到时的培养瓶拍一张照片,显微镜拍收到时的细胞100X,200X各一张)。
2.用75%的酒精消毒(建议配置75%的酒精的水是灭菌过的)。
3.严格无菌操作,打开细胞培养瓶。
4.将细胞培养瓶内的培养基用吸管完全吸出(严禁直接倾倒),放入另一无菌容器中(建议换新的培养基培养细胞)。
5.用PBS 2-3ml/次轻轻洗细胞表面,洗3-4次遍,加入0.05%胰酶-EDTA1-1.5ml,显微镜下观察细胞变圆,轻轻拍打培养瓶直到细胞脱落,加入终止液终止。
6.1000rpm,5min离心,重悬细胞。
7.换新的细胞培养瓶,37℃,5%CO2培养。
操作要点:
1)将培养基在37℃水浴锅预热;准备一个15mL无菌的离心管,加入8mL预热培养基。
2)将冻存细胞从液氮罐中取出,快速放入37℃水浴锅中复温(可准备一洁净的烧杯,装满37℃的水,细胞冻存管取出后迅速放入烧杯内,再逐步转移到水浴锅中)。轻轻晃动冻存管,使细胞能在1~2min内完全解冻,使细胞能尽快通过最易受损的温度段(-5~0℃)。注意冻存管管口不能没入水中,BRL(大鼠肝细胞)避免引起污染。
3)用75%酒精擦拭冻存管后再置于超净台内,将管内细胞转移至准备好的离心管内,轻轻吹打液体,使细胞均匀分散,降低DMSO浓度,吹打时避免产生气泡。用新鲜培养基洗管壁2次,均转移至离心管内。
4)800rpm离心5min,弃上清,加入新鲜的培养基,吹打制成细胞悬液。
5)将细胞悬液转移至T25细胞瓶内,补加适量的培养基,轻轻晃动细胞瓶使细胞分布均匀,放入温箱内培养。
6)产品仅用于科研观察细胞贴壁生长情况,换新鲜培养基以去除死细胞。继续培养,待细胞长至80~90%汇合时正常传代。一般刚复苏的细胞需经过2~3次传代,细胞活力恢复后才能进行后续的实验。
特别声明:本产品及我公司所售其他产品均为科研类试剂产品,严禁用于药物、医疗及其他非科研用途。
HumanCyclin-D1ELISAKit人细胞周期素D1 规格:2ml/支
ES(HumanEndostatin)ELISAKit人内皮抑素 规格:0.2g/支
Fbg(MouseFibrinogen)ELISAKit小鼠血纤蛋白原 规格:2g
TATELISAKit大鼠凝血酶抗凝血酶复合物 规格:50mg
ATRELISAKit大鼠抗凝血酶受体 规格:0.5g
FE(Humanferritin)ELISAKit人铁蛋白 规格:50mg/瓶
PAF(Mouseplateletactivatingfactor)ELISAKit小鼠血小板活化因子 规格:50mg
TRELISAKit大鼠凝血酶受体 规格:0.15ml
MTF(Humanmicrotransferrinuria)ELISAKit人微量转铁蛋白 规格:50mg
smActinin-Alpha(MouseskeletalmuscleActinin-Alpha)ELISAKit小鼠横纹肌辅肌动蛋白α 规格:1g
MYS(MouseMyosin)ELISAKit小鼠肌球蛋白 规格:20mg
cTn-IELISAKit大鼠心肌肌钙蛋白Ⅰ 规格:1g
TIMP-1(Humantissueinhibitorofmetalprotease1)ELISAKit人基质金属蛋白酶组织抑制因子1 规格:20mg
PI3KELISAKit大鼠磷酸肌醇3激酶 规格:50mg
MHCI/H-2I(MousemajorhistocompatibilitycomplexI)ELISAKit小鼠主要组织相容性复合体Ⅰ类 规格:2g
Kihadanin A栎樱酸(标准品) 分子式:C21H30O5 纯度:%
Alisol C连翘苷(标准品) 分子式:C30H44O3 性状:Oil 纯度:%
Taraxasterone连翘酯苷A(标准品) 分子式:C30H46O3 性状:Oil 纯度:%
16α-Hydroxybauerenol连翘酯苷B(标准品) 分子式:C23H30O7 纯度:%
16-Oxoalisol A莲心碱(标准品) 分子式:C23H32O7 纯度:%
Ursolic aldehyde三尖杉碱(标准品) 分子式:C39H48O13 纯度:%
Alisol C 23-acetate辽东楤木皂苷Ⅹ(标准品) 分子式:C39H48O13 纯度:%
11-Anhydro-16-oxoalisol A硫酸氨基葡萄糖(标准品) 分子式:C16H26O2 纯度:98.5%
Astragaloside III硫酸黄连碱(标准品) 分子式:C44H70O23 纯度:99.0%
人细胞;KMS-11规格株;HA109Anti-BACH1 Polyclonal Antibody 上皮样生长特性: 贴壁生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
鼠嵌合抗体CHO细胞株;MHC-SZ123Anti-ATL1 Polyclonal Antibody 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次
杂交瘤细胞株;SZ-168Anti-KLF2 Polyclonal Antibody 淋巴母细胞样生长特性: 悬浮生长特征特性: 该细胞属专利保藏,其特征特性尚未公开。培养条件: MEM-EBSS:MinimumEssentialMedium(MEMEagleswithEarle'sBalancedSalts)10%FBS传代方法: 1:3传代,3-4天传1次