免疫荧光技术的实验步骤：

一、准备好试剂与仪器：

磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。

二、实验步骤

1.滴加0.01mol/L，pH7.4的PBS于待检标本片上，十分钟后弃去，使标本保持一定湿度。

2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液，使其完全覆盖标本，置于有盖搪瓷盒内，保温一定时间以三十分钟为参考。

3.取出玻片，置玻片架上，先用0.01mol/L，pH7.4的PBS冲洗后，再按顺序过0.01mol/L，pH7.4的PBS三缸浸泡，每缸三到五分钟，并不停地摇晃振荡。

4.取出玻片，用滤纸吸去多余水分，但不使标本干燥，加一滴缓冲甘油，以盖玻片覆盖。

5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
别    名  B cell CLL/lymphoma 11A (zinc finger protein); B cell CLL/lymphoma 11A (zinc finger protein) isoform 2; B cell CLL/lymphoma 11A; B cell lymphoma/leukaemia 11A; B-cell CLL/lymphoma 11A; B-cell lymphoma/leukemia 11A; BC11A_HUMAN; BCL 11A; BCL-11A; BCL11A; BCL11A B cell CLL/lymphoma 11A (zinc finger protein) isoform 1; BCL11A L; BCL11A S; BCL11A XL; BCL11AL; BCL11AS; BCL11AXL; C2H2 type zinc finger protein; COUP TF interacting protein 1; COUP-TF-interacting protein 1; Ctip 1; CTIP1; Ecotropic viral integration site 9; Ecotropic viral integration site 9 homolog; Ecotropic viral integration site 9 protein; Ecotropic viral integration site 9 protein homolog; Evi 9; EVI-9; Evi9; FLJ10173; FLJ34997; HBFQTL5; KIAA1809; Zinc finger protein 856; ZNF856.

纯化方法  affinity purified by Protein A

储 存 液  Preservative: 15mM Soium zde, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4

产品应用   WB=1:100-500  ELISA=1:500-1000  IHC-P=1:100-500  IHC-F=1:100-500  ICC=1:100-500  IF=1:100-500 

英文名称  Anti-Ctip1/BCL-11A

中文名称  B淋巴细胞/11/锌指蛋白856抗体

浓    度  1mg/1ml

规 格  0.2ml/200μg

抗体来源  Rabbit

克隆类型  polyclonal

交叉反应  Human, Mouse, Rat, Chicken, Rabbit

产品类型  一抗

研究领域   转录调节因子 淋巴细胞 b-淋巴细胞 表观遗传学

蛋白分子量  predicted molecular weight: 91kDa

性    状  Lyophilized or Liquid

免 疫 原  KLH conjugated synthetic peptide derived from human Ctip1 (751-835aa)

亚    型  IgG

抗体的制备过程：

1. 免疫原：普通的大分子蛋白，通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白，纯化鉴定后可直接作为免疫原；小分子蛋白或化合物等分子量小，需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原，常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。

2. 免疫动物：常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等，大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。

3. 免疫血清的收集：一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血，家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用采血，家兔、山羊、绵羊可采用采血。

4. 免疫血清的纯化与鉴定：得到的抗血清需要进一步的纯化，利用偶联了抗原的亲和柱进行层析，具有高效，特异性强，纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。

5. 免疫血清的保存：抗体一般比较稳定，在-80℃ ～-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价，而真空干燥保存时间可以更久。联祖保存前需经除菌并添加防腐剂。

抗体分子标记技术：

（一）原理

当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。

（二）准备

1.试剂

经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体；0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5；无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液；100g/L三醋酸；70%乙醇；新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5）；胺T反应终止缓冲液；

2.仪器

凝胶过滤柱；￥-记数器；玻璃纤维滤。

（三）操作要点

1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行；

2.如果氧化反应损伤蛋白质，可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m，并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml；

3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年；

4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天）；

5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低；

6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。

5-溴乙酰水杨酰胺5-Bromoacetyl salicylamide

5-基异恶唑5-Methylisoxazole

L-亮氨酰甘氨酸H-LEU-GLY-OH

重氧水Heavy-oxygen water

脲丙基三乙氧基硅烷N-(Triethoxysilylpropyl)urea

5-茚醇5-INDANOL

7-羟基香豆素7-Hydroxycoumarin

L-3,3-二基丙氨酸3,3-Diphenyl-L-alanine

3-基-4-基吡啶-N-氧化物4-Nitro-3-picoline N-oxide

FMOC-LYS(BOC)-WANG RESINFMOC-LYS(BOC)-WANG RESIN

5-硫基四氮唑5-(Methylthio)-1H-tetrazole

乙酰哈巴苷8-O-acetylharpagide

硫化MERCURY(II) SULFIDE

乙二醇叔丁ETHYLENE GLYCOL MONO-TERT-BUTYL ETHER

3,3',4,4'-联四酸二酐3,3',4,4'-Biphenyltetracarboxylic dianhydride

PCDH8  原钙粘附蛋白8抗体    特价促销 0.2ml Histrelin Acetate

PCDHA1  原钙粘附蛋白α1抗体    特价促销 0.2ml Penicillin V potassium salt

PCDHA2  原钙粘附蛋白α2抗体    特价促销 0.2ml 2'-deoxyinosine

PCDHA3  原钙粘附蛋白α3抗体    特价促销 0.2ml Nifekalant hydrochloride

PCDHA4  原钙粘附蛋白α4抗体    特价促销 0.2ml Nifekalant hydrochloride

PCDHA5  原钙粘附蛋白α5抗体    特价促销 0.2ml Sincalid(CCK-8)

PCDHA9  原钙粘附蛋白α9抗体    特价促销 0.2ml Thymosin α1 Acetate

phospho-GNA12(Ser68)  磷鸟苷调节蛋白12抗体    特价促销 0.1ml Orbifloxacin
 Nervonic acid人凝血子Ⅹ(FⅩ)ELISA试剂盒0.99

Caftaric acid人凝血子Ⅸ(FⅨ)ELISA试剂盒0.995

人凝血子Ⅷ相关抗原(Ⅷ-Ag)ELISA试剂盒0.98

B淋巴细胞/11/锌指蛋白856抗体0.2ml/200μgDehydrocheilanthifoline人凝血子Ⅶ(FⅦ)ELISA试剂盒 0.995

Aloe-emodin-8-O-β-D-glucopyranoside人凝血子Ⅲ(FⅢ)ELISA试剂盒0.975

Emodin-1-O-glucoside人凝血子Ⅱ(FⅡ)ELISA试剂盒0.986

Chrysophanol 1-glucoside人凝血酶原段F1+2(F1+2)ELISA0.969

Chrysophanol 8-O-beta-D-glucoside人凝血酶原(PT)ELISA试剂盒 0.988