血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
货号 |
MCS甲基柠檬酸合酶测试剂盒可见分光光度法 |
100管/96样 |
微量法 |
LZ-01589S |
商品介绍:
测定意义 测定原理: 丙酮酸与2,4-二硝基苯肼作用,生成丙酮酸-2,4-二硝基苯腙,在碱性溶液中呈樱红色。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计/酶标仪、台式离心机、可调式移液器、微量石英比色皿/96孔板、研钵、冰、蒸馏水。 |
实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
人APP-PS1双基因转染细胞株(HEK293);APP-PS1酸钙,英文名或英文缩写:Calcium iodate,级别:AR,99%,规格:5克
SUNE-1细胞,低分化细胞系 鼠色素瘤细胞系,B16-Fo细胞 CM-H031人食管上皮细胞完全培养基100mLε-己内酯 6-Hqxcnolcctonq 20-44-3
NR8383(大鼠肺泡巨噬细胞) 5×106cells/瓶×2葛根素,英文名或英文缩写:Puerarin,级别:BR,粘度50 mpe.s,规格:10克
Promocell C-26140 Placeal Epithelial CellGrowth Medium KIT, 胎盘上皮细胞生长培养基套装 500ml曲酸shēng huà shì jì容量:100克
脑微内皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)PonceauS
10g/100g原装 Amresco 0860
NCI-H2227(人小细胞细胞) 5×106cells/瓶×2 FRhK-4(恒河猴胚肾细胞)S-腺苷高半胱酸水解酶100克
RN-h, 大鼠海马趾神经元3-磺酸 3-Pyridinesulfonic acid,≥98.0% 636-73-7 5G 通用试剂
RPS6KA6 Others Human 人 RSK4 / RPS6KA6 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 木质速磺醋钙盐 LIGNOSULFONIC cCID, CcLCIUM ScLT8061/2/7
人成纤维细胞;HFF5-尿苷一嶙酸二钠盐5克
SPA-A1细胞, 人非小细胞,NCI-H1975细胞 CL-0452T/G
HA-VSMC(人平滑肌细胞)5×106cells/瓶×2木糖赖酸脱氧胆酸琼脂XLD AGAR
CL-0125J82(人细胞)5×106cells/瓶×2替米沙坦酰基-β-D-葡萄糖苷酸Telmisartan Acyl-β-D-glucuronide质量规格:美国进口
P3X63-Ag8.653细胞,鼠瘤细胞 人Butt`s瘤细胞,NAMALWA细胞 小鼠网织细胞;M5076-d4Isoniazid-d4质量规格:美国进口
AsPC-1(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2噻托溴铵-d3Tiotr-d3 Bromide质量规格:美国进口
CX3CL1 Others Human 人 CX3CL1 / N 人细胞裂解液 (阳性对照) 去乙基盐酸胺酮-d4Desethyl Amiodarone-d4 质量规格:美国进口
兔肾细胞;RK-13去乙基盐酸胺酮Desethyl Amiodarone 质量规格:美国进口
MCS甲基柠檬酸合酶测试剂盒可见分光光度法牦牛皮肤细胞;BMU-S1SILVERSTAINING-SILVERDE-STAININGKIT银染染色脱色试剂盒1KitRT
F11R Others Human 人 JAM-A 人细胞裂解液 (阳性对照) 2-酰基 2-ccqtylthiophqnq1988/12/3
CM-H036人小肠平滑肌细胞完全培养基100mLZ-DEVD-pNAZ-DEVD-pNA 5MGDRY ICE-F
HA Others H12N1 甲型 H12N1 (A/mallard duck/Alberta/342/1983) 血凝素HA1 (Hemagglutinin) 人细胞裂解液 (阳性对照) 琼脂糖SFR5克
小鼠肝外胆管上皮细胞完全培养基 100mL10097-02-62,2-二羟甲基2,2-Bis(xy7noxymetxyl)butyric
acid
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。