抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,联祖通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血,家兔、山羊、绵羊可采用采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
别 名 Cell proliferation inducing gene 46 protein; Cell proliferation inducing protein 46; CK 18; CK18; CYK18; Cytokeratin 18; Cytokeratin endo B; Cytokeratin18; Keratin 18; Keratin D; Keratin type I cytoskeletal 18; Kerd; KRT18.
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Soium zde
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
产品名称 |
细胞角蛋白18抗体(C端)0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
英文名称 |
Anti-CK18 |
货号 |
LZK64946 |
英文名称 Anti-CK18
中文名称 细胞角蛋白18抗体(C端)
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Dog, Rabbit
产品类型 一抗
研究领域 免疫学 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 48kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human CK18 C-terminus
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
宝藿苷Ⅰ;baohuoside I 113558159 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 20mg
酰次;Benzoylhypac 63238664 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 20mg
间二氧;纯品型;标准品;有证书 57681 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
2;4滴异辛;纯品型;标准品;有证书 25168267 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
莎稗;纯品型;标准品莎薭;有证书 64249010 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
草黄;纯品型;标准品;有证书 68505691 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
四;纯品型;标准品;有证书 117180 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
;纯品型;标准品;有证书 28772567 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
螟丹(巴丹);纯品型;标准品;有证书 22042597 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
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草;纯品型;标准品;有证书 23184669 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
;纯品型;标准品;有证书 71697591 52315078 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.1g
D果糖;标准品 57487 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.25g
抗坏血(维生素C);纯品型;标准品;有 50817 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 0.25g
柚皮苷查尔 73692509 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%;20mg
罗汉果苷IV 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支;
Hederacolchiside A1 106577393 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%;5mg/支
辽东楤木皂苷V 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
秦皮素;秦皮亭;白蜡树内 574845 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
辛辣内A 130430976 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: 5mg/支
花旗松素;二槲皮素;紫杉叶素;黄杉素 480182 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
白术内Ⅰ; 苍术内I 73069133 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
木兰花; 木兰花; 唐松草; 88273 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,10mg/支
隐丹参 35825571 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
远志 22338712 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
知母皂苷AⅢ; 知母皂苷A3; 知母皂苷 41059794 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
细胞角蛋白18抗体(C端)0.1ml/100μg0.2ml/200μg没食子 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,10mg/支
罗汉果皂苷IVa 88901411 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%;10mg/支
甘草苷 551155 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
番泻苷D 37271173 订购|咨询 定做种属检测试剂盒/中药材鉴定试剂盒 低温 规格: HPLC≥98%,20mg/支
血小板生成素(TPO)抗体 英文名称:TPO ELISA Kit,TPO,
血红蛋白(Hb)抗体 英文名称:Hb ELISA Kit,Hb,
紧张素Ⅰ转酶(ACEⅠ)抗体 英文名称:ACEⅠ ELISA Kit,ACEⅠ,
心肽(ANP)抗体 英文名称:ANP ELISA Kit,ANP,
纤溶酶/纤维蛋白溶酶(PL/Fbn)抗体 英文名称:PL/Fbn ELISA Kit,PL/Fbn,
N-肉豆蔻酰基转移酶1(NMT1)抗体 英文名称:NMT1 ELISA Kit,NMT1,
Marapsin蛋白(MPN)抗体 英文名称:MPN ELISA Kit,MPN,
Neudesin神经营养子(NENF)抗体 英文名称:NENF ELISA Kit,NENF,
ISLLIM同源框蛋白1(ISL1)抗体 英文名称:ISL1 ELISA Kit,ISL1,
GM2神经节苷脂激活子(GM2A)抗体 英文名称:GM2A ELISA Kit,GM2A,
D组着色性干皮病偶联子(XPD)抗体 英文名称:XPD ELISA Kit,XPD,
Cupidin蛋白(CPD)抗体 英文名称:CPD ELISA Kit,CPD,
CD72分子(CD72)抗体 英文名称:CD72 ELISA Kit,CD72,
B-抗原2(BAGE2)抗体 英文名称:BAGE2 ELISA Kit,BAGE2,
Anoctamin9蛋白(ANO9)抗体 英文名称:ANO9 ELISA Kit,ANO9,
Ⅴ型胶原α2(COL5α2)抗体 英文名称:COL5α2 ELISA Kit,COL5α2,
成纤维细胞生长子5(FGF5)抗体 英文名称:FGF5 ELISA Kit,FGF5,