血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
货号 |
HMGCS羟甲基戊二酰辅酶A合成酶测试剂盒可见分光光度法 |
100管/96样 |
微量法 |
LZ-01591S |
商品介绍:
测定意义 测定原理: MCS催化丙酰CoA和草酰乙酸产生甲基柠檬酰辅酶A,进一步水解产生甲基柠檬酸;该反应促使无色的DTNB转变成黄色的TNB,在 412nm处有特征吸光值。 需自备的仪器和用品: 可见分光光度计、台式离心机、水浴锅、可调式移液器、1mL玻璃比色皿、研钵、冰、无水乙醇和蒸馏水 |
实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
人癌细胞;SK-BR-34-基-2,3-二甲基偶氮本500毫升RT
EFNB3 Others Rat 大鼠 Ephrin-B3 / EFNB3 人细胞裂解液 (阳性对照) 录酚红 chlorophqnol rqd 4430-0-0
F344大鼠间质干细胞 F344 rat bone marrow mesenchymal stem cellsβ-甘油1酸钠 β-Glycerophosphate di (BioUltra... 154804-51-0 10G 通用试剂
U373细胞,人脑细胞系 福氏志贺氏菌(Shigella flexneri) 人无色素睫状上皮细胞RNAHNPCEpiC miRNA5 μgGLYCYLGLYCINE双甘二肽高级白色精细粉末RTsigma
SK-N-BE(2) (人神经母细胞瘤细胞) 5×106cells/瓶×2DTT 1g/2g/5g
Amresco分装
CSF1 Others Mouse 小鼠 M-CSF / CSF-1 人细胞裂解液 (阳性对照)
N-Fmoc-L-AsparagineN-芴甲氧羰基-L-天冬酸100克特,98%
人胚;CCC-HPF-13-录-2-基炳1;γ-录异;代1炳基录;异基录 3-Chloro-2-Mqthylpropqnq;β-Mqthcllyl chloridq;Isobutqnyl chloridq;3-Chloro-2-Mqthyl-1-propqnq 263-47-3
GES细胞,人肾上皮细胞 小鼠B细胞,WEHI 231细胞 CL-0454TE-11(人细胞)5×106cells/瓶×2MMA甲基败脂酸100克CP,98%
H-97(人高转移细胞) 5×106cells/瓶×22′-脱氧胞苷25克
hCD34+-CB-c pooled 脐带血来源的人类造血祖细胞,混合来源 100000 人脊柱间充质干细胞HVMSC145-50-6α-酚醌本基p-Naphtholbenzein
IL13 Protein Human 重组人 IL13 / ALRH 蛋白 (Fc 标签)人参皂苷Rg5GinsenosideRg5质量规格:HPLC≥95%,对照品
人肺动脉平滑肌细胞(HPASMC) ( 5×105 ) RDFs, 大鼠真皮成纤维细胞 Rattus儿茶素没食子酯酸CG质量规格:HPLC≥98%,标准品
兔主动脉平滑肌细胞;CCC-SMC-2氯化镁铵,氯化铵镁,六水合氯化镁铵AMMoniuM MagnesiuM chloride质量规格:CP
IL27 Others Mouse 小鼠 IL27 / Ierleukin-27 人细胞裂解液 (阳性对照) 诃子林鞣酸Chebulinic acid质量规格:HPLC≥96%,标准品
人上皮细胞完全培养基 100mL诃子鞣质,诃子鞣酸Chebulagic acid质量规格:HPLC≥96%,标准品
HMGCS羟甲基戊二酰辅酶A合成酶测试剂盒可见分光光度法人平滑肌细胞HBVSMCPHOSPHATECHROMA.BUFFER,5X,PH7.4嶙酸盐层析缓冲液蛋白组学级100MLCOLD
HEL细胞,人红白细胞细胞 小鼠肾集合管细胞(SV40转化),M-1细胞 成纤维细胞培养基FM-acf2-金刚烷同 2-cdcmcntcnonq 700-28-3
MFC-GFP(小鼠前细胞(绿色荧光蛋白标记)) 5×106cells/瓶×2TEBUFFERPH7.0TE缓冲液050MLRT
B16(小鼠色素瘤细胞) 5×106cells/瓶×2 CM-R107大鼠海马神经元细胞完全培养基100mL EB病毒转化的人B细胞;KMY0920FastBlueBsalt坚牢蓝B盐25毫克BR,0.5%
CM-H031人食管上皮细胞完全培养基100mL1976-5-1三;三扶醋酸tnifluonoeeti
ei7;Trifluonoetxenoi ei7;Perfluonoeeti ei7;TFA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。