血液样本的收集:
全血根据收集的条件,分成不抗凝和抗凝两种。同时,不抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血清;抗凝分离出的上层黄色的液体我们称之为血浆。
1、不抗凝收集血清:将收集好的全血,静置1~2小时,直接低速离心分离出血清待用或保存。
2、抗凝收集血浆: 收集抗凝全血,轻轻颠倒充分抗凝后,可直接低速离心分离血浆(也可静置半小时左右再低速离心分离血浆)待用或保存。根据不同抗凝剂的性能特征,选择合适的抗凝剂。实验室常用的抗凝剂有肝素的各种盐、EDTA及枸橼酸钠。
【友情提示】:本产品仅供科研研究使用,不得用于人体临床直接检测。避免给您带来不必要的损失,请仔细阅读购买说明!
产品名称 |
规格 |
检测方法 |
货号 |
ICL异柠檬酸裂解酶测试剂盒微量法 |
50管/48样 |
可见分光光度法 |
LZ-01594S |
商品介绍:
测定意义 测定原理 HMGCS催化乙酰CoA与乙酰乙酰CoA生成羟甲基戊二酰CoA,同时产生CoASH,使DTNB转化为黄色的TNB,在412nm下有特征吸光值。 所需的仪器和用品 可见分光光度计、台式离心机、可调式移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。 |
实验通用规则:
1、将液体加到酶标孔中时,避免枪头和孔内液体接触,可使枪头上的液滴和孔壁接触,液滴会自然流下去。
2、用枪吸取液体时速度不能太快,以免产生气泡而使吸取量不准确。
3、温浴时,要用不干胶或胶带纸封好酶标板,防止水分的蒸发。
4、洗液不够时,可用蒸馏水自行配制PH7.4,0.02M的磷酸缓冲液,加入0.1%的吐温20作为洗液。加入1/1000的叠氮钠后可长期保存。
5、实验时,要使底物避光保存。
6、洗板时,每次洗液加入后,应静置1分钟,使清洗更加。没有洗板机时,倒去液体后,要将酶标板在报纸或毛纸上用力拍干。
7、要在实验前1小时将试剂盒从冰箱中取出,使各种试剂都恢复到室温,以使结果更稳定。
8、吸取液体时,要用量程和需要量接近的枪去吸,减少误差。
9、要配备20ul、50ul、100ul、1000ul和排枪各一支。吸取不同的液体后,要更换枪头。即使是吸取标准品时。
10、液体全部加完后,可将酶标板在桌子上平行轻轻晃动30秒,混匀液体。也可以用酶标仪的晃动功能。
操作步骤:
实验开始前,各试剂均应平衡至室温(试剂不能直接在37℃溶解);试剂或样品稀释时,均需混匀,混匀时尽量避免起泡。实验前应预测样品含量,如样品浓度过高时,应对样品进行稀释,以使稀释后的样品符合试剂盒的检测范围,计算时再乘以相应的稀释倍数。
1. 加样:分别设空白孔、标准孔、待测样品孔。空白孔加样品稀释液100μl,余孔分别加标准品或待测样品100μl,注意不要有气泡,加样将样品加于酶标板孔底部,尽量不触及孔壁,轻轻晃动混匀,酶标板加上盖或覆膜,37℃反应120分钟。为保证实验结果有效性,每次实验请使用新的标准品溶液。
2. 弃去液体,甩干,不用洗涤。每孔加检测溶液A工作液 100μl(在使用前一小时内配制),酶标板加上覆膜, 37℃反应60分钟。
3. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板3次,每次浸泡1-2分钟,大约400μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
4. 每孔加检测溶液B工作液(同检测A工作液) 100μl,酶标板加上覆膜37℃反应60分钟。
5. 温育60分钟后,弃去孔内液体,甩干,洗板5次,每次浸泡1-2分钟,350μl/每孔,甩干(也可轻拍将孔内液体拍干)。
6. 依序每孔加底物溶液90μl,酶标板加上覆膜37℃避光显色(30分钟内,此时肉眼可见标准品的前3-4孔有明显的梯度兰色,后3-4孔梯度不明显,即可终止)。
7. 依序每孔加终止溶液50μl,终止反应,此时蓝色立转黄色。终止液的加入顺序应尽量与底物液的加入顺序相同。为了保证实验结果的准确性,底物反应时间到后应尽快加入终止液。
8. 用酶联仪在450nm波长依序测量各孔的光密度(OD值)。在加终止液后立即进行检测。
人脑干星形胶质细胞HA-bs2′-脱氧胞苷-5′-二嶙酸三钠盐5克RT
STK4 Others Human 人 STK4 / MST1 杆状病毒-昆虫细胞裂解液 (阳性对照) 三化硼 Boron trifluoride methanol complex sol... 2802-68-8 100ML 通用试剂
猞猁皮肤成纤维样细胞;ELS1L-半胱安醋;L-半膀胱安基醋;L-β-流轻代炳安醋;L-2-安基-3-炳醋 L-Cystqinq;L-2-cMino-3-Mqrccptopropcnoic ccid;L-α-cMino-β-thiopropionic ccid;(R)-2-cMino-3-Mqrccptopropionic ccid;CyS 2-90-4
BALB/3T3细胞,BALB/C小鼠胚成纤维细胞 人癌细胞,PC-2细胞 CM-M024小鼠成纤维细胞完全培养基100mL焦嶙酸钠5克2~8℃
大鼠细胞;UMR-10650-28-2β-雌二醇;雌甾二醇;17β-雌二醇;3,17β-二羟基-1,3,5(10)雌甾三1;1,3,5(10)-雌甾三1-3,17β-二醇;雌甾-1,3,5(10)-三1-3,17β-二醇β-Estradiol;17β-Estradiol;3, 17β-Dixy7noxy-1, 3,
5(10)-estratriene;1, 3, 5(10)-Estratriene-3, 17β-diol;cis-Estradiol;3, 17-Epidixy7noxyestratriene;17β-Estra-1, 3,
5(10)-triene-3, 17β-diol;
TE671 subline No.2(人横纹肌细胞) 5×106cells/瓶×2硫氮杂,英文名或英文缩写:PZ,级别:AR,95%,规格:5克
Hs 578T(人癌细胞) 5×106cells/瓶×2 正常细胞 Sars结构蛋白表达株;293sars181A拂硅醋铵 cmmonium 16919-19-0
Sars结构蛋白表达株;293 001A粘胶质酶,英文名或英文缩写:Pectinase,级别:生物技术级,30u/mg,规格:25克
KIR2DL3 Others Human 人 KIR2DL3 / CD158B2 / NKAT-2 人细胞裂解液 (阳性对照) 人参皂甙Rh1,英文名或英文缩写:Ginsenoside Rh1,级别:BR,规格:5克
NCI-H157 人非小细胞(牛胆盐)
IL12A & IL12B Others Mouse 小鼠 IL12A &
IL12B Heterodimer 人细胞裂解液 (阳性对照) 天麻素Gastrodin质量规格:HPLC≥98%,BR
J82 人膀胱移行细胞癌甜菊苷(标准品)Stevioside质量规格:HPLC≥98%,标准品
NCI-H716 [H716]人结直肠腺癌细胞 NCI-H716 [H716] human colorectal adenocarcinoma cells RPMI-1640(GIBCO)+10%FBS土贝母苷甲(标准品)Tubeimoside I质量规格:HPLC≥98%,标准品
VEGFA Protein Human 重组人 / 食蟹猴 VEGF / VEGFA / VEGF165 蛋白土荆皮乙酸(标准品)Pseudolaric Acid B质量规格:HPLC≥98%,标准品
小鼠中脑缝神经细胞(脑脊)(MN-r)(1×106) HT-29, 人细胞 Human土木香内酯(标准品)Alantolactone质量规格:HPLC≥98%,标准品
ICL异柠檬酸裂解酶测试剂盒微量法IL3RA Others Human 人 IL3RA / CD123 人细胞裂解液 (阳性对照) 球蛋白抗原大鼠IgG500克
CM-H029人脐带单核细胞完全培养基100mL4,5-二青基咪坐 (DCI) (2-8℃) 1H-Imidczolq-4,5-diccrbonitnilq2011/8/7
LRP11 Others Human 人 LRP11 人细胞裂解液 (阳性对照) 8-xy7noXYinoneOLINE8-羟基ACS级米白色至褐色结晶粉末RTsigma
子宫内膜上皮细胞Many types of cells包装:5 × 105方(1ml)wo7iumPHOSPHATEMONOBASICDIHYDRATE嶙酸钠美国药典级白色结晶粉末RTsigma
HSF细胞,人皮肤成纤维细胞 人癌细胞,MDA-MB-435S细胞 平滑肌细胞培养基SMCM-sf-prf4-甲基本酚盐 99%NA
选择抗凝的注意点:
①、每一份样本所加的抗凝剂的量要一致,同时所取的全血的量也要尽量一致;
②、收集抗凝全血后一定要轻轻颠倒,充分抗凝,防止部分血液未接触到抗凝剂而导致凝固;
③、抗凝全血收集的血浆相对较多(1ml抗凝全血能分离出0.4~0.5ml血浆);
④、抗凝收集的血浆冷冻保存后,解冻时可能会出现絮状浑浊,如有则需要离心去掉浑浊后用于测定。