抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,联祖通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血,家兔、山羊、绵羊可采用采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
别 名 Microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta; ATG8F; Autophagy related protein LC3 B; Autophagy related ubiquitin like modifier LC3 B; Autophagy-related protein LC3 B; Autophagy-related ubiquitin-like modifier LC3 B; MAP1 light chain 3 like protein 2; MAP1 light chain 3-like protein 2; MAP1A/1B light chain 3 B; MAP1A/1BLC3; MAP1A/MAP1B LC3 B; MAP1A/MAP1B light chain 3 B; MAP1ALC3; MAP1LC3B; Microtubule associated protein 1 light chain 3 beta; Microtubule associated proteins 1A/1B light chain 3B; Microtubule-associated protein 1 light chain 3 beta; Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B; MLP3B_HUMAN.
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 Preservative: 15mM Sodium Azide, Constituents: 1% BSA, 0.01M PBS, pH 7.4
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 ICC=1:100-500 IF=1:100-500
产品名称 |
自噬微管相关蛋白轻链β3/MAPLC3β抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
英文名称 |
Anti-LC3B |
货号 |
LZK65007 |
英文名称 Anti-LC3B
中文名称 自噬微管相关蛋白轻链β3/MAP LC3β 抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Chicken, Cow, Danio rerio
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 神经生物学 信号转导
蛋白分子量 predicted molecular weight: 15kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human Microtubule-associated proteins 1A/1B light chain 3B
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
藏红花纯度:≥95% Adiponectin 脂联素(多肽抗原 5 x 5mg
岑纯度:≥98% ADM (Adrenomedullin 10 x 250mg
蟾毒灵 纯度:≥98% ADM (Adrenomedullin 10 x 250mg
蟾毒他灵纯度:98%ADM (Adrenomedullin 1g
长春 纯度:≥95% ADM 1-52/AM 1-52 (Adrenomedullin 1-52 100mg
长春地辛 纯度:≥95% ADM R, Adrenomedullin receptor 肾上腺髓质素受体(抗原 1g
长春花碱纯度:≥98% ADNP (NAP 1g
长春碱 纯度:≥95% ADORA3/A3AR(adenosine receptor A3 100mg腺苷受体A3抗原
长春纯度:≥92% ADRA2 peptide 能受体2抗原 10mgADRA2 peptide 能受体2抗原
翅子罗汉果I纯度:≥98% ADRB3/ Beta3-AR ( Beta3-adrenergic receptor 1g能受体β3
穿心莲内酯 纯度:≥98% AEBP1 (Adipocyte enhance binding protein 1 100mg脂肪细胞增强结合蛋白1
穿心莲乙素 纯度:≥98% AEG-1 peptide AEG-1抗原 1gAEG-1 peptide AEG-1抗原
次百部碱 纯度:≥98%Ag-ARC(ARG3.1/ARC, Activity-regulated cytoskeleton-associated protein 10mg
刺五加苷B纯度:95%AGER(Advanced glycosylation end product-specific receptor 5mg
刺五加苷D 纯度:≥98% AGEs 晚期糖基终末产物AGEs 1gAGEs 晚期糖基终末产物AGEs
E-钙粘附分子(E-Cadherin/CDH1/CD324)抗体 英文名称:E-Cadherin/CDH1/CD324 ELISA Kit,E-Cadherin/CDH1/CD324,
成纤维细胞生长子23(FGF23)抗体 英文名称:FGF23 ELISA Kit,FGF23,
组-N-甲基转移酶(HNMT)抗体 英文名称:HNMT ELISA Kit,HNMT,
转生长子β受体Ⅰ(TGFβR1)抗体 英文名称:TGFβR1 ELISA Kit,TGFβR1,
坏死子α诱导蛋白2(TNFαIP2)抗体 英文名称:TNFαIP2 ELISA Kit,TNFαIP2,
脂肪酶N(LIPN)抗体 英文名称:LIPN ELISA Kit,LIPN,
着丝粒蛋白36(CENP36)抗体 英文名称:CENP36 ELISA Kit,CENP36,
载脂蛋白L5(APOL5)抗体 英文名称:APOL5 ELISA Kit,APOL5,
原钙黏素β14(PCDHβ14)抗体 英文名称:PCDHβ14 ELISA Kit,PCDHβ14,
应激诱导蛋白1(STIP1)抗体 英文名称:STIP1 ELISA Kit,STIP1,
补体断5b(C5b)抗体 英文名称:C5b ELISA Kit,C5b,
白介素8(IL-8/CXCL8)抗体 英文名称:IL-8/CXCL8 ELISA Kit,IL-8/CXCL8,
表达于SiSo细胞系的受体结合型抗原(RCAS1)抗体 英文名称:RCAS1 ELISA Kit,RCAS1,
自噬微管相关蛋白轻链β3/MAPLC3β抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg白介素1Rα(IL-1Rα)抗体 英文名称:IL-1Rα ELISA Kit,IL-1Rα,
γ干扰素(IFN-γ)抗体 英文名称:IFN-γ ELISA Kit,IFN-γ,
β-促脂素(β-LPH)抗体 英文名称:β-LPH ELISA Kit,β-LPH,
α2巨球蛋白(α2-MG)抗体 英文名称:α2-MG ELISA Kit,α2-MG,