抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,联祖通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血,家兔、山羊、绵羊可采用采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
别 名 2310009M24Rik; LRP; Lung Resistance Related Protein; Lung resistance-related protein; Major Vault Protein; MVP; MVP_HUMAN; VAULT 1; VAULT1.
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
产品名称 |
肺耐药相关蛋白抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
英文名称 |
Anti-LRP/MVP |
货号 |
LZK65020 |
英文名称 Anti-LRP/MVP
中文名称 肺耐药相关蛋白抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Dog, Pig, Cow, Horse, Rabbit, Guinea Pig
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 细胞凋亡
蛋白分子量 predicted molecular weight: 99kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human LRP (97-14aa)
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
蒲公英萜醇纯度:≥90%CCR-3(CC chemokine receptor 3 25GCC趋子受体3抗原
紫草素 纯度:≥98% CCR-4(C-C chemokine receptor 4 1g细胞表面趋子受体4抗原
异佛手柑内酯纯度:≥98%CCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋子受体6抗原 100mgCCR-6/CD196 peptide 细胞表面趋子受体6抗原
异古伦宾纯度:≥98%CCR-7(CC chemokine receptor 7 25mg
异荭草素纯度:≥98%CD10/CALLA (Neutral Endopeptidase 10mgCD10抗原
异茴芹内酯纯度:≥95%CD105/Endoglin CD105蛋白 5mgCD105/Endoglin CD105蛋白
异绿原A纯度:≥96%CD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转生长子β受体抗原 10mgCD105/Endoglin/TGF- Beta receptor CD105/转生长子β受体抗原
3,5-二咖啡酰奎宁纯度:≥96%CD117/c-kit/SCFR 干细胞生长子受体/细胞表面分抗原(抗原 10mg
异绿原B纯度:≥97%CD122/IL-2RB(Imterleukm-2 Receptor beta 5mgCD122/白介素2受体β链抗原
3,4-二咖啡酰奎宁纯度:≥97%CD133 造血干细胞抗原(多肽抗原 25mg
异绿原C纯度:≥97%CD133 造血干细胞抗原(多肽抗原 10mg
4,5-二咖啡酰奎宁纯度:≥97%CD133 造血干细胞抗原CD133 5mgCD133 造血干细胞抗原CD133
异麦角甾苷纯度:≥98%CD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原 100mgCD138/Syndecan-1 多配体蛋白聚糖1抗原
异木香内脂 纯度:≥98% CD14(cluster of differentiation antigen 14 1gCD14/内毒素受体抗原
异嗪皮啶 纯度:≥98% CD146/MCAM 细胞粘附分子CD146抗原 100mgCD146/MCAM 细胞粘附分子CD146抗原
层粘连蛋白γ2(LAMγ2)抗体 ELISAKitforLamininGamma2(LAMC2) 规格:48T/96T
过氧蛋白同源物(PXDN)抗体 ELISAKitforPeroxidasinHomolog(PXDN) 规格:48T/96T
胚胎植入前蛋白3(PREI3)抗体 ELISAKitforPreimplantationProtein3(PREI3) 规格:48T/96T
坏死子α(TNFα)抗体 ELISAKitforTumorNecrosisFactorAlpha(TNFa) 规格:48T/96T
抗氧抗体(OLAb)抗体 ELISAKitforAnti-OxidizedLowDensityLipoproteinAntibody(OLAb) 规格:48T/96T
甲状腺结合球蛋白(TBG)抗体 ELISAKitforThyroxineBindingGlobulin(TBG) 规格:48T/96T
兰尼定受体1(RYR1)抗体 ELISAKitforRyanodineReceptor1,Skeletal(RYR1) 规格:48T/96T
二酯酶11A(PDE11A)抗体 ELISAKitforPhosphodiesterase11A(PDE11A) 规格:48T/96T
多巴受体D4(DRD4)抗体 ELISAKitforDopamineReceptorD4(DRD4) 规格:48T/96T
肌腱蛋白M2(TENM2)抗体 ELISAKitforTenascinM2(TENM2) 规格:48T/96T
视黄醇饱和酶(RETSAT)抗体 ELISAKitforRetinolSaturase(RETSAT) 规格:48T/96T
维生素B9(VB9)抗体 ELISAKitforVitaminB9(VB9) 规格:48T/96T
氨基端前脑素(NT-ProBNP)抗体 ELISAKitforN-TerminalProBrainNatriureticPeptide(NT-ProBNP) 规格:48T/96T
C1q坏死子相关蛋白9(C1QTNF9)抗体 ELISAKitforC1qAndTumorNecrosisFactorRelatedProtein9(C1QTNF9) 规格:48T/96T
肺耐药相关蛋白抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μgⅢ型前胶原(PCⅢ)抗体 ELISAKitforProcollagenIII(PCIII) 规格:48T/96T
尿溶蛋白2(UPK2)抗体 ELISAKitforUroplakin2(UPK2) 规格:48T/96T
诱导型一氧合酶(NOS2)抗体 ELISAKitforNitricOxideSynthase2,Inducible(NOS2) 规格:48T/96T