抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,联祖通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采血,家兔、山羊、绵羊可采用采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
别 名 lipoprotein lipase; LIPD; LPL protein; HDLCQ11; Lipase; Lipoprotein lipase 1, LPL; MGC137861; MGC93586.
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
产品名称 |
脂蛋白脂酶抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
英文名称 |
Anti-LPL/PLASTIN2 |
货号 |
LZK65030 |
英文名称 Anti-LPL/PLASTIN2
中文名称 脂蛋白脂酶抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Pig, Cow, Rabbit, Sheep, Guinea Pig, G
产品类型 一抗
研究领域 心 细胞生物 免疫学 细胞粘附分子
蛋白分子量 predicted molecular weight: 52kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human LPL
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。
14-去氧穿心莲内酯纯度:≥95%CTn1 (cardiac troponin 1 11 x 10mg心肌肌钙蛋白
人参苷元F11纯度:≥97%CT-R (Calcitonin receptor 11 x 5mg
瑟丹内酯纯度:≥97%CULLIN (Cdc53/CUL 7 x 10mg
山茱萸新苷纯度:90%Cx32(Connexin-32 7 x 5mg间隙连接蛋白32抗原
山茱萸裂苷纯度:90%CX36 (Connexin-36 500G间隙连接蛋白36抗原
商陆皂苷乙纯度:95% 98%cx3cl1(chemokine (C-X3-C motif 25G配体1抗原
升麻醇-3-O-α-L-拉伯糖苷纯度:≥99%CX3CR1(CX3C-chemokine receptor 1 250mgCX3C趋子受体1抗原
矢车菊素3-O-葡萄糖苷纯度:≥95%Cx40 (Connexin-40 1g
双脒脲纯度:95%CXCL10/IP-10 CXCL10趋子10/干扰素诱导蛋白10抗原 250mgCXCL10/IP-10 CXCL10趋子10/干扰素诱导蛋白10抗原
双氢环孢A纯度:≥95%CXCL14(CXC-chemokine ligand 16 1gCXC趋子14抗原
双氢环孢C纯度:≥95%CXCL16 peptide CXC趋子16抗原 100mgCXCL16 peptide CXC趋子16抗原
双氢环孢H纯度:≥95%CXCR1 (CXC-chemokine receptor 1 50mg细胞表面趋子受体1抗原
双去甲氧基姜黄素纯度:≥98%CXCR3/CD183 peptide 细胞表面趋子受体3抗原 500GCXCR3/CD183 peptide 细胞表面趋子受体3抗原
穗花牡荆苷纯度:≥98%CXCR6(CXC-chemokine receptor 6 25G peptide 细胞表面趋子受体6抗原
塔拉萨敏纯度:≥97%CXorf36(uncharacterized protein Cxorf36 precursor 25mg脱羧酶蛋白体36 cxorf36抗原
臂板蛋白4C(Sema 4C)抗体 英文名称:Sema 4C ELISA Kit,Sema 4C,
白介素6(IL-6)抗体 英文名称:IL-6 ELISA Kit,IL-6,
白介素18(IL-18)抗体 英文名称:IL-18 ELISA Kit,IL-18,
γ氨基丁(GABA)抗体 英文名称:GABA ELISA Kit,GABA,
β氨基己糖苷酶A(β-Hex A)抗体 英文名称:β-Hex A ELISA Kit,β-Hex A,
α1微球蛋白(MGα1)抗体 英文名称:MGα1 ELISA Kit,MGα1,
SPARC相关模块钙结合蛋白1(SMOC1)抗体 英文名称:SMOC1 ELISA Kit,SMOC1,
人抗脑组织抗体(ABAb)抗体 英文名称:ABAb ELISA Kit,ABAb,
聚集蛋白(Agrin)抗体 英文名称:Agrin ELISA Kit,Agrin,
人抗弓形体IgM抗体(anti-tox IgM)抗体 英文名称:anti-tox IgM ELISA Kit,anti-tox IgM,
结合珠蛋白/触珠蛋白(Hpt/HP)抗体 英文名称:Hpt/HP ELISA Kit,Hpt/HP,
甲状旁腺激素1受体(PTH1R)抗体 英文名称:PTH1R ELISA Kit,PTH1R,
基质金属蛋白酶8/中性粒细胞胶原酶(MMP-8)抗体 英文名称:MMP-8 ELISA Kit,MMP-8,
活凝血子Ⅻ(FⅫa)抗体 英文名称:FⅫa ELISA Kit,FⅫa,
脂蛋白脂酶抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg核糖核酶(RNASE1/RIB1/RNS1)抗体 英文名称:RNASE1/RIB1/RNS1 ELISA Kit,RNASE1/RIB1/RNS1,
骨形成蛋白15(BMP15)抗体 英文名称:BMP15 ELISA Kit,BMP15,
高铁血红蛋白(MHB)抗体 英文名称:MHB ELISA Kit,MHB,