别 名 Kallikrein12; Kallikrein-12; Kallikrein like protein 5; Kallikrein related peptidase 12; KLK 12; KLK L5; KLK12; KLKL5.
纯化方法 affinity purified by Protein A
储 存 液 0.01M PBS, pH 7.4 with 10 mg/ml BSA and 0.1% Sodium azide
产品应用 WB=1:100-500 ELISA=1:500-1000 IP=1:20-100 IHC-P=1:100-500 IHC-F=1:100-500 IF=1:100-500
产品名称 |
激肽释放酶12抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μg |
英文名称 |
Anti-KLK12 |
货号 |
LZK65090 |
英文名称 Anti-KLK12
中文名称 激肽释放酶12抗体
浓 度 1mg/1ml
规 格 0.1ml/100μg 0.2ml/200μg
抗体来源 Rabbit
克隆类型 polyclonal
交叉反应 Human, Mouse, Rat, Cow
产品类型 一抗
研究领域 细胞生物 免疫学 信号转导 细胞粘附分子 锌指蛋白
蛋白分子量 predicted molecular weight: 25kDa
性 状 Lyophilized or Liquid
免 疫 原 KLH conjugated synthetic peptide derived from human KLK12
亚 型 IgG
免疫荧光技术的实验步骤:
一、准备好试剂与仪器:
磷酸盐缓冲盐水、荧光标记的抗体溶液、缓冲甘油、搪瓷桶三只、有盖搪瓷盒一只、荧光显微镜、玻片架、滤纸、37℃温箱等。
二、实验步骤
1.滴加0.01mol/L,pH7.4的PBS于待检标本片上,十分钟后弃去,使标本保持一定湿度。
2.滴加适当稀释的荧光标记的抗体溶液,使其完全覆盖标本,置于有盖搪瓷盒内,保温一定时间以三十分钟为参考。
3.取出玻片,置玻片架上,先用0.01mol/L,pH7.4的PBS冲洗后,再按顺序过0.01mol/L,pH7.4的PBS三缸浸泡,每缸三到五分钟,并不停地摇晃振荡。
4.取出玻片,用滤纸吸去多余水分,但不使标本干燥,加一滴缓冲甘油,以盖玻片覆盖。
5.立即用荧光显微镜观察。观察标本的特异性荧光强度。
抗体的制备过程:
1. 免疫原:普通的大分子蛋白,通过分子克隆构建载体并在大肠杆菌中进行诱导表达获得重组蛋白,纯化鉴定后可直接作为免疫原;小分子蛋白或化合物等分子量小,需要偶联载体对该分子进行改造才能使其成为具有免疫原性的抗原,常见偶联载体如BSA、OVA、HAS等。
2. 免疫动物:常用于制备抗血清的动物有豚鼠、家兔、鸡、大小鼠等,大量 时需要用到狗、绵羊、山羊等。
3. 免疫血清的收集:一般家兔、绵羊、山羊可采用静动脉采血,家兔、豚鼠、大鼠、鸡可采用*采血,家兔、山羊、绵羊可采用采血。
4. 免疫血清的纯化与鉴定:得到的抗血清需要进一步的纯化,利用偶联了抗原的亲和柱进行层析,具有高效,特异性强,纯度高的特定。接着要鉴定纯化蛋白的含量、相对分子的质量、纯度以及特异性。
5. 免疫血清的保存:抗体一般比较稳定,在-80℃ ~-20 ℃可以保存约5年而不会影响效价,而真空干燥保存时间可以更久。保存前需经除菌并添加防腐剂。
盐二甲标准品纯度:≥95% TM(Thrombomodulin 25G调节蛋白多肽
炔雌醇甲标准品纯度:≥98%TmR2(GDNFR Beta;TRN-R;GFR-alpha-2;NTNR-2 1g
美索达嗪标准品纯度:≥98% Tn-C(Tenascin-C 1g C端抗原
美司那标准品纯度:≥98% TNF- Beta(Tumor Necrosis Factor- Beta 25G坏死子-β抗原
美沙拉嗪标准品纯度:≥98% TNFAIP1(Tumor necrosis factor-alpha-induced protein 1 1G坏死子α诱导蛋白1抗原
美罗培南标准品纯度:≥98% TNF-alpha 坏死子-α抗原 10mgTNF-alpha 坏死子-α抗原
巯基嘌呤标准品纯度:≥98% TNF-Alpha(Tumor Necrosis Factor-Alpha 5mg
盐美普卡标准品纯度:≥98% TOPO II Alpha/DNA TP II Alpha (DNA topoisomerase II Alpha 500mgDNA拓普西异构酶Ⅱ抗原
标准品纯度:≥98% TP I (topoisomerase I 250mg拓普西异构酶Ⅰ抗原
甲泼尼松标准品纯度:≥98% TP-5(Thymopentin 10mg胸腺五肽
盐甲哌卡标准品纯度:≥97% TPH (Trptophan Hydroxylase 250mg
甲标准品纯度:≥98% TPO(Thyroid Peroxidase 500ML
美芬妥标准品纯度:≥98% TRA16 睾丸激素受体相关蛋白 25MLTRA16 睾丸激素受体相关蛋白
溴甲哌佐酯标准品纯度:≥98%TRA16 (Testicular orphan nuclear receptor-4 (TR4 100G
甲酯标准品纯度:≥98% TRADD(TNF receptor 1 associated via death domain 500G有死亡区的坏死子受体1相关蛋白抗原
异质性胞核核糖核蛋白H(hnRNP H)抗体 英文名称:hnRNP H ELISA Kit,hnRNP H,
样生长子结合蛋白3(IGFBP-3)抗体 英文名称:IGFBP-3 ELISA Kit,IGFBP-3,
Vertnin蛋白(VRTN)抗体 英文名称:VRTN ELISA Kit,VRTN,
Smad同源物3(Smad3)抗体 英文名称:Smad3 ELISA Kit,Smad3,
TGFβ诱导早期应答基1(TIEG1)抗体 英文名称:TIEG1 ELISA Kit,TIEG1,
R-脊椎蛋白4(RSPO4)抗体 英文名称:RSPO4 ELISA Kit,RSPO4,
P选择素(SELP)抗体 英文名称:SELP ELISA Kit,SELP,
N-转移酶6(NAT6)抗体 英文名称:NAT6 ELISA Kit,NAT6,
NK6同源框蛋白1(NKX6-1)抗体 英文名称:NKX6-1 ELISA Kit,NKX6-1,
MRG结合蛋白(MRGBP)抗体 英文名称:MRGBP ELISA Kit,MRGBP,
Klothoβ蛋白(KLβ)抗体 英文名称:KLβ ELISA Kit,KLβ,
G抗原13(GAGE13)抗体 英文名称:GAGE13 ELISA Kit,GAGE13,
激肽释放酶12抗体0.1ml/100μg0.2ml/200μgEts变异体3(ETV3)抗体 英文名称:ETV3 ELISA Kit,ETV3,
二氢二醇脱氢酶(DHDH)抗体 英文名称:DHDH ELISA Kit,DHDH,
凋亡信号调节激酶I(ASK1)抗体 英文名称:ASK1 ELISA Kit,ASK1,
多聚蛋白1(MMRN1)抗体 英文名称:MMRN1 ELISA Kit,MMRN1,
蛋白激酶R(PKR)抗体 英文名称:PKR ELISA Kit,PKR,
抗体分子标记技术:
(一)原理
当应用化学氧化法时(NaI)遇强氧化剂,离子被氧化为分子,所生成的自由分子可与某些基团进行卤化反应。蛋白质分子可进行卤化反应的基团主要为酪氨酸残基,某些组氨酸残基也可能进行化。在应用胺T( Chloramine T)法的实验中,所用的氧化剂(1,3,4,6- tetrachloro-3a,6adipheny l-glucoluril)强挥发性的有机溶剂中。该溶剂加入试管后,先让其挥发(即让氧化剂将试管包被),然后把Na125I和蛋白质液加入包被好的试管中,反应完成即将混合液移入他管终止反应。
(二)准备
1.试剂
经亲和层析纯化的多克隆抗体或单克隆抗体;0.5mol/L磷酸钠缓冲液,pH7.5;无载体的Na125I3.7GBq/ml(100mCi/ml)的NaOH液;100g/L三醋酸;70%乙醇;新鲜制备的含2mg/m1络胺T的0.5mol/L磷酸钠缓冲液(pH7.5);胺T反应终止缓冲液;
2.仪器
凝胶过滤柱;¥-记数器;玻璃纤维滤。
(三)操作要点
1.用胺T法进行化,也可在大约pH7.0的缓冲液中进行;
2.如果氧化反应损伤蛋白质,可将抗体与异硫氰酸荧光素(FITC)偶联)胺T量减少到0.02mg/m,并将偏重亚硫酸液的浓度降到0.024mg/ml;
3. Iodogen-包被的试管可在干燥器中,于室温下保存多年;
4.1251标记的抗体,在制备后六周内均可使用(1251的半衰期为59.6天);
5.要注意保证所用的Na1251是新鲜的,陈旧制剂的比活性低;
6.酪氨酸的碘化偶尔会对抗原的抗体结合位点有干扰,因此降低其结合能力,但这种情况很少见。