丙酮酸待测样品处理试剂盒
体液丙酮酸比色法定量检测试剂盒
添加剂丙酮酸比色法定量检测试剂盒
饮料丙酮酸比色法定量检测试剂盒
酒类丙酮酸比色法定量检测试剂盒
商品属性:
产品名称:H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法
规格:50管/24样
检测方法:可见分光光度法
货号:LZ-01322S
分类:辅酶Ⅰ系列
用途:公司产品仅用于科研
商品介绍:
测定意义
辅酶ⅠNAD(H)广泛存在于动物、植物、微生物和培养细胞中,NAD+是糖酵解(EMP)和三羧酸循环(TCA)的主要氢受体,生成的NADH经呼吸电子链(ETC)传递把电子交给氧,在合成ATP的同时,形成大量的ROS,同时NADH再生为NAD+。糖、脂、蛋白质三大代谢物质分解中的氧化反应绝大部分通过这一体系完成。NAD(H)含量和NADH/NAD+比值的高低可用于评价糖酵解和TCA循环的强弱。较高的NAD(H)及NADH/NAD+比值说明细胞呼吸耗氧量较高,处于过氧化状态。此外,NADH/NAD+比值升高也可抑制糖酵解和TCA循环。另外,NAD+降解产物对细胞信号传导、代谢和基因表达等具有重要的调控作用。
测定原理
分别用酸性和碱性提取液提取样品中NAD+和NADH,NADH通过PMS的递氢作用,还原氧化型噻唑蓝(MTT)为甲瓒,在570nm下检测吸光值;而NAD+可被乙醇脱氢酶还原为NADH,进一步采用MTT还原法检测。
需自备的仪器和用品
可见分光光度计、台式离心机、移液器、1 mL玻璃比色皿、研钵、冰和蒸馏水。
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实验结果判断我有妙招:
1、定量测定结果根据标准曲线计算样品中待测物的含量。
2、以样品孔的OD值大于阴性对照OD值+2~3SD,作为阳性结果的阈值。
3、以P/N值(阳性孔OD值/阴性孔OD值)大于或等于2.1为阳性,P/N值小于2.1,但大于1.5为可疑,P/N小于1.5为阴性。
4、ELISA试剂盒目测定性法:加入底物经酶解和终止反应后,肉眼观察阳性孔颜色明显深于(竞争法则浅于)阴性对照,与阴性对照的颜色接近者,判定为阴性。
与您分享常用不稳定试剂的分类及要求:
① 易挥发、低燃点的试剂要密封,放于阴凉、通风、远离火源处保存。
② 与水蒸气,水发生反应的物质要密封,并远离水源保存。
③ 易与氧气作用的试剂,应将其固体或晶体密封保存,不宜长期存放其水溶液,亚硫酸,氢硫酸溶液要密封存放,钾,钠,白磷更要采用液封形式。
④ 与二氧化碳反应的物质要密封保存,其相应的溶液较固体更易反应,所以更要注意密封保存。
⑤ 易挥发或自身分解的试剂要密封,放于阴凉通风处保存。
测定步骤:
1.加样
1. 除包被外都需45度加样
2.加样体积要准确
3.管底加样,不能加在管壁上
4.加样时不能产生气泡
2.温浴
1.加标本后和加结合物后,应立即放入按规定的反应温 度的水浴箱。
2.各ELISA板不应叠在一起。
3.为避免蒸发,板上应加盖,或将板平放在底部垫有湿 纱布的金属湿盒中。
4.加入底物后,反应的时间和温度通常不做严格要求。 如室温高于20℃,ELISA板可避光放在实验台上,以便 不时观察,待对照管显色适当时,即可终止酶反应。
3.洗涤
1.洗涤在ELISA过程中不是反应步骤,但却 是决定实验成败的关键。
2.目的是洗去反应液中没有与固相抗原或 抗体结合的物质以及在反应过程中非特 异性吸附于固相载体的干扰物质。
4.读板
1.阴性对照颜色极浅,在定性测定中一般 可采用目视比色。
2.如用酶标仪测定结果,准确性决定于 ELISA板底的平整与透明度、酶标仪的质 量和软件的算法。
注意事项:
①加入试剂的顺序应一致,以保证所有反应板孔温育的时间一样。
②使用干净的塑料容器配置洗涤液。
③按照鸡血红蛋白(HB)ELISA检测试剂盒说明书中标明的时间、加液的量及顺序进行温育操作。
④底物A应挥发,避免长时间打开盖子。底物B对光敏感,避免长时间暴露于光下。避免用手接触,有毒。实验完成后应立即读取OD值。
⑤洗涤酶标板时应充分拍干,不要将吸水纸直接放入酶标反应孔中吸水。
⑥使用一次性的吸头以免交叉污染,吸取终止液和底物A、B液时,避免使用带金属部分的加样器 。
⑦实验中不用的板条应立即放回包装袋中,密封保存,以免变质。
⑧试剂应按标签说明书储存,使用前恢复到室温。稀稀过后的标准品应丢弃,不可保存。
⑨不用的其它试剂应包装好或盖好。不同批号的试剂不要混用。
ACD 肾上腺皮质发育异常蛋白抗体
Angiotensin II type 1A receptor 紧张素Ⅱ1A型受体抗体
ABI1 ABI1/SSH3BP1蛋白抗体
Acetyl-Histone H1.4 (K53) 乙酰化组蛋白H1b抗体
phospho-Androgen Receptor (Ser578) 磷酸化雄激素受体抗体
APE1 多功能DNA修复酶抗体
AAK1 AP2关联激酶1抗体
AQP1 水通道蛋白1抗体
AATK AATK细胞凋亡关联酪氨酸激酶抗体
ABCB5 ATP结合蛋白家族5抗体
APNG N-甲基嘌呤DNA糖基化酶
AU5 tag AU5 tag标签抗体
ATP2c1 钙离子ATP酶通道蛋白抗体
alpha-L-arabinofuranosidase 果桃α-L-阿拉伯呋喃糖苷酶抗体
Apelin 脂肪因子Apelin抗体
人乳腺浸润性导管癌旁皮肤细胞;CCD-1095Sk
人正常乳腺细胞;Hs 578Bst
人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞;NK-92 [NK92]
人B淋巴母细胞;HMy2.CIR
人恶性非霍奇金患者的自然杀伤细胞;NK-92MI [NK92MI]
人脐内皮细胞;HUV-EC-C
人正常乳腺上皮细胞;MCF 10A
人胚肾细胞;2V6.11
人正常肺上皮细胞;BEAS-2B
人;HFL1
人胚;IMR-90
人胚胎,皮肤,肌肉;M-7
人胚胎,皮肤,肌肉;M-20
人胚胎,皮肤,肌肉;M-22
人正常上皮细胞;RWPE-1
人羊膜细胞;WISH
人胚;MRC-5
人胚胎;WI-38
人胚肾细胞;293 [HEK-293]
人淋巴细胞;1301
H辅酶ⅠNAD测试剂盒可见分光光度法人胚肺二倍体细胞;KMB-17
人胚;WI-38 [WI38]
人脐内皮细胞(人细胞污染);ECV-304 [ECV304;ECV 304]
人胚;MRC-5
人羊膜细胞;WISH
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