商品属性:
产品名称 |
产品规格 |
货号 |
人肝星形细胞 |
5×105细胞数 |
LZ-YX9508 |
产品名称:人肝星形细胞
组织来源:肝组织
产品规格:25cm2培养瓶/5×105 cells/瓶
细胞简介:
人肝星形细胞分离自肝脏组织;肝星形细胞(HSC)又名肝贮脂细胞、维生素A贮存细胞、窦周细胞、Ito细胞等,是肝脏细胞外基质的主要来源。HSC在激活后可进一步转化为肌成纤维细胞样细胞,各种可导致的因素均将HSC作为最终靶细胞。正常情况下,HSC处于静止状态,当肝脏发生反应或受到机械刺激等损伤时,HSC的表型由静止型转变为激活型,激活的HSC可通过增生和分泌细胞外基质参与的形成及肝内结构的重建,此过程也是的中心环节。肝星形细胞是肝脏特有的间充质细胞,约占肝脏细胞总数的8%-13%。作为肝脏合成细胞外基质的主要细胞群,肝星形细胞不仅能分泌蛋白多糖、糖蛋白等细胞外基质成分,合成一定量的胶原酶以维持正常的基底膜结构,还能通过其突起的收缩参与肝窦的微循环调节同。此外,肝星形细胞能通过合成肝细胞生长因子、胰岛素样生长因子、表皮生长因子等。
本公司生产的人肝星形细胞采用胶原酶消化制备而来,细胞总量约为5×105个/瓶;细胞经α-SMA免疫荧光鉴定,细胞纯度可达90%以上,且不含有HIV-1、 HBV、HCV、支原体、细菌、酵母和真菌等。
5、培养基信息:
培养基内容:MSCM基础培养基, FBS, Penicillin, Streptomycin等;
我们推荐使用人肝星形细胞专用培养基作为体外人肝星形细胞专用培养基。
注意事项:
1. 收到细胞后首先观察细胞瓶是否完好,培养液是否有漏液、浑浊等现象,若有上述现象发生请及时和我们联系。
2. 仔细阅读细胞说明书,了解细胞相关信息,如细胞形态、所用培养基、血清比例、所需细胞因子等。
3. 请客户用相同条件的培养基用于细胞培养。培养瓶内多余的培养基可收集备用,细胞传代时可以一定比例和客户自备的培养基混合,使细胞逐渐适应培养条件;建议使用完全培养基。
4. 建议客户收到细胞后前3天各拍几张细胞照片,记录细胞状态。
5. 该细胞只能用于科研。
细胞培养操作:
1)复苏细胞:将含有 1mL 细胞悬液的冻存管在 37℃水浴中迅速摇晃解冻,加 入 4mL 培养基混合均 匀。在 1000RPM 条件下离心 4 分钟,弃去上清液,补 加 1-2mL 培养基后吹匀。然后将所有细胞悬液加入培养瓶中培 养过夜(或将 细胞悬液加入 10cm 皿中,加入约 8ml 培养基,培养过夜)。 天换液并 检查细胞密度。
2)细胞传代:如果细胞密度达 80%-90%,即可进行传代培养。
1. 弃去培养上清,用不含钙、镁离子的 PBS 润洗细胞 1-2 次。
2. 加 1ml 消化液(0.25%Trypsin-0.53mM EDTA)于培养瓶中,置于 37℃培 养箱中消化 1-2 分钟,然后在显微镜下观察细胞消化情况,若细胞大部分 变圆并脱落,迅速拿回操作台,轻敲几下培养 瓶后加少量培养基终止消 化。
3. 按 6-8ml/瓶补加培养基,轻轻打匀后吸出,在 1000RPM 条件下离心 4 分 钟,弃去上清液,补加 1-2mL 培养液后吹匀。
4. 将细胞悬液按 1:2 比例分到新的含 8ml 培养基的新皿中或者瓶中。
3)细胞冻存:待细胞生长状态良好时,可进行细胞冻存。下面 T25 瓶为类;
1. 细胞冻存时,弃去培养基后,PBS 清洗一遍后加入 1ml 胰酶,细胞变圆 脱 落后,加入 1ml 含血清的培养基终止消化,可使用血球计数板计数。
2. 4 min 1000rpm 离心去掉上清。加 1ml 血清重悬细胞,根据细胞数量加 入血 清和 DMSO,轻轻混匀,DMSO 终浓度为 10%,细胞密度不低于1x106/ml,每支冻存管冻存 1ml 细胞悬液,注意冻 存管做好标识。
3. 将冻存管置于程序降温盒中,放入-80 度冰箱,2 个小时以后转入液氮灌储存。记录冻存管位置以便下次拿取。
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