首页 >
公司动态
>
人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)elis...
人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)elisa定量检测试剂盒样本处理及要求
2024-09-20
人抗细胞膜DNA抗体(cmDNA)elisa定量检测试剂盒样本处理及要求：
1.血清：全血标本请于室温放置2小时或4℃过夜后于1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
2. 血浆：可用EDTA或肝素作为抗凝剂，标本采集后30分钟内于2 - 8°C 1000g离心20分钟，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
3. 组织匀浆：用预冷的PBS (0.01M, pH=7.4)冲洗组织，去除残留血液（匀浆中裂解的红细胞会影响测量结果），称重后将组织剪碎。将剪碎的组织与对应体积的PBS（一般按1:9的重量体积比，比如1g的组织样品对应9mL的PBS，具体体积可根据实验需要适当调整，并做好记录。推荐在PBS中加入蛋白酶抑制剂）加入玻璃匀浆器中，于冰上充分研磨。为了进一步裂解组织细胞，可以对匀浆液进行超声破碎，或反复冻融。将匀浆液于5000×g离心5~10分钟，取上清检测。
4. 细胞培养物上清或其它生物标本：1000g离心20分钟，取上清即可检测，或将标本放于-20℃或-80℃保存，但应避免反复冻融。
注：标本溶血会影响*检测结果，因此溶血标本不宜进行此项检测。
在处理完上述各类生物标本后，确保每一步操作都严格遵循实验规程，是保障实验结果准确性的关键。对于细胞培养物上清或其他生物标本，若需长期保存以备后续分析，建议在-80℃条件下储存，以最大限度地减少生物活性物质的降解。同时，记录好每批标本的处理时间、离心条件及保存位置，便于后续追踪与复现实验。
值得注意的是，尽管离心是去除杂质、获取纯净样本的重要手段，但过高的离心速度或过长的时间也可能导致样本中某些敏感成分的损失或变性。因此，在选择离心参数时，需综合考虑样本类型、实验目的及预期结果，必要时可设置预实验进行优化。
此外，对于组织匀浆的制备，除了上述提到的PBS冲洗、剪碎、研磨及离心步骤外，还需注意操作过程中的无菌原则，避免外源微生物的污染。特别是在加入蛋白酶抑制剂时，要确保其浓度适宜，既能有效抑制蛋白酶活性，又不影响后续检测方法的灵敏度。
最后，关于溶血标本的处理，一旦发现标本溶血，应立即标记并单独存放，避免与正常标本混淆。对于溶血原因的分析，可从采血技术、抗凝剂使用、储存条件等多方面进行排查，以期在未来的实验中减少类似情况的发生。同时，探索开发对溶血具有更强耐受性的检测方法，也是提高实验灵活性和准确性的重要方向。
公司动态